《临床检验技术》课件——ABO血型鉴定.pptxVIP

临床检验基础

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ABO血型的鉴定

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主要内容

ABO血型鉴定的原理

试验方法

实验介绍

影响因素

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ABO血型鉴定的原理

ABO血型的鉴定：

是指对ABO血型系统中抗原、抗体的检测，包括正定型与反定型。

正定型

正、反定型结果相互验证，结果一致才能报告ABO血型结果。

反定型

已知特异性抗体

未知红细胞膜表面的抗原

已知血型的红细胞

未知血清中的抗体

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实验方法

ABO血型鉴定

盐水介质试验

微柱凝集试验

试管法

平板法

微孔板法

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实验介绍

实验器材

小试管、载玻片、标记笔、蜡笔、

滴管、台式离心机、显微镜等。

实验试剂

生理盐水、抗A、抗B单克隆抗体试剂、

2%～5%的A型、B型和O型标准红细胞悬液。

标本：抗凝全血

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实验介绍

操作步骤

（1）正定型：

1）标本制备：

①分离血浆：取标本，编号，900g离心5分钟，取上层血浆于试管中，标记。

②洗涤红细胞：加入约1～2倍体积生理盐水于上述红细胞管中，混匀，洗涤，同上离心，弃去上清液。

重复操作2～3次，最后一次洗涤后的上清液应清亮并完全弃去。

③制备2%～5%红细胞悬液：

取小号试管1只，加入洗涤后的压积红细胞和生理盐水，混匀，标记。

2）标记：取2支试管，编号，标记抗A、抗B。

3）加抗体：分别用滴管在各管中加50µl相应抗A、抗B。

4）加待检红细胞悬液：用滴管在各管中分别加50µl待检2%～5%红细胞悬液，轻轻混匀。

5）离心：1000g离心15秒。

6）观察结果：先观察上清液有无溶血，再用中指轻轻弹、摇试管，边摇边观察红细胞浮起程度、

有无凝集现象及凝集程度。如肉眼观察可疑凝集，取反应物于玻片上，用低倍镜观察。记录观察结果。

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实验介绍

操作步骤

（2）反定型：

取3支小试管，分别标记A1c、Bc和Oc，

于各管中分别加50µl待检者血或血清，

再分别加入50µl和标记相对应标准红细胞悬液，轻轻混匀。

1000g离心15秒后，观察结果。

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实验介绍

操作步骤

（3）判断结果：结合正反定型结果，判断待检者红细胞ABO血型，标准如下表。

正定型

反定型

抗A阴性

抗B阴性

0型

抗A阳性

抗B阳性

B型

A型

AB型

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实验介绍

（4）报告结果：

红细胞ABO血型鉴定：A型、B型、AB型、或O型（盐水介质试管法）。

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影响因素

规范操作

器材清洁

抗体试剂

被检测者血液

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