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- 2026-02-08 发布于福建
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2026年药企招聘:免疫检验技师面试题目及答案参考
一、专业知识与技能(共5题,每题10分,总分50分)
1.题目:简述ELISA和WesternBlot技术在免疫检测中的主要区别及其在药物研发中的应用场景。
答案:
ELISA(酶联免疫吸附测定)和WesternBlot(蛋白质印迹技术)是两种常见的免疫检测技术,其区别及应用场景如下:
-原理差异:
-ELISA基于抗原抗体反应,通过酶标记的二抗或生物素标记的抗体与底物反应显色,适用于定量或半定量检测。
-WesternBlot通过SDS分离蛋白质,再转移至膜上与抗体结合,最终通过化学发光或荧光检测,主要用于蛋白质鉴定和特异性分析。
-应用场景:
-ELISA:常用于药物研发中的抗体药物滴度测定、细胞因子检测、药物靶点验证等,操作简便、通量高。
-WesternBlot:适用于验证ELISA结果的特异性、检测蛋白质表达水平、修饰状态(如磷酸化)等,但通量较低、耗时较长。
2.题目:解释流式细胞术(FlowCytometry)在免疫细胞分选中的核心原理,并举例说明其在免疫治疗药物筛选中的应用。
答案:
流式细胞术通过激光激发细胞荧光,并根据细胞大小、颗粒度和多个荧光标记抗体信号进行单细胞分选。核心原理包括:
-激光激发:单色激光照射细胞,使其发出不同波长的荧光信号。
-荧光检测:通过荧光素(如PE、FITC、APC)标记抗体,检测细胞表面或内部蛋白(如CD3、CD8、PD-1)。
-数据采集:基于荧光强度和时间,对细胞进行分类和定量分析。
-分选功能:通过细胞分选技术(FACS),将特定亚群(如CAR-T细胞)分离纯化。
应用实例:在PD-1/PD-L1抑制剂研发中,流式可评估药物对免疫细胞抑制效果的动态变化,助力优化给药方案。
3.题目:描述细胞因子释放实验(如LPS诱导的TNF-α释放)的实验流程,并说明如何判断药物的抗炎活性。
答案:
细胞因子释放实验流程:
1.细胞准备:用LPS刺激RAW264.7细胞,诱导TNF-α释放。
2.收集上清:收集培养液,通过ELISA检测TNF-α浓度。
3.药物干预:在实验前加入候选药物,比较未处理组与对照组的TNF-α水平。
抗炎活性判断:药物抑制TNF-α释放的比例越高,说明抗炎活性越强,通常以IC50值衡量。
4.题目:解释免疫印迹(Immunoblotting)与传统WesternBlot的区别,并说明其在抗体药物表征中的优势。
答案:
免疫印迹是WesternBlot的简化版本,通过直接将细胞裂解液点印在膜上,结合抗体检测目标蛋白。区别在于:
-WesternBlot:需SDS分离,灵敏度高但步骤繁琐。
-免疫印迹:直接点印,节省时间,适用于快速筛选,但分辨率较低。
优势:抗体药物表征中,可用于快速验证抗体特异性,尤其适用于大规模样品初筛。
5.题目:列举三种免疫细胞表面标志物,并说明其在肿瘤免疫治疗中的临床意义。
答案:
-CD8+T细胞:杀伤性T细胞,PD-1/PD-L1抑制剂的主要靶点。
-CD4+Treg:抑制性T细胞,可影响免疫治疗疗效。
-CD56+NK细胞:自然杀伤细胞,可辅助抗肿瘤免疫。
临床意义:通过检测这些标志物,可评估肿瘤微环境免疫状态,预测治疗反应及耐药性。
二、实验设计与操作(共5题,每题10分,总分50分)
1.题目:设计一个实验验证新研发的抗体药物能否阻断PD-1/PD-L1结合。
答案:
实验方案:
1.细胞系:使用PD-1表达细胞系(如Jurkat)和PD-L1表达细胞系(如HeLa)。
2.分组:
-空白对照组:未加药物。
-阳性对照组:加入已知PD-1/PD-L1阻断剂(如Nivolumab)。
-实验组:加入新抗体药物。
3.检测:通过流式细胞术检测PD-1/PD-L1结合强度(如FITC标记PD-1抗体,PE标记PD-L1抗体)。
4.结果分析:若新抗体抑制结合率≥80%,则说明阻断效果显著。
2.题目:说明如何通过ELISA优化抗体药物效价测定条件(pH、酶浓度等)。
答案:
优化步骤:
1.pH优化:测试不同缓冲液(pH6.0-8.0)对结合曲线的影响,选择A值最高的pH值。
2.酶浓度:调整辣根过氧化物酶(HRP)浓度,确保信号线性且背景低。
3.抗体浓度:通过预实验确定最佳捕获抗体和检测抗体浓度,避免过饱和或不足。
3.题目:设计一个实验评估抗体药物在体内是否引起自身免疫反应。
答案:
实验方案:
1.动物模型:使用免疫缺陷小鼠(如NSG)转染患者来源的B细胞。
2.干预:注射抗体药物,检测转染B细胞是否增殖(如通过CFSE标记流式
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