培养基实验试题及答案.docxVIP

第PAGE页共NUMPAGES页

培养基实验试题及答案

一、选择题（每题3分，共15分，每题只有一个正确选项）

1.下列关于培养基的叙述，正确的是（）

A.培养基中必须添加葡萄糖作为唯一碳源

B.固体培养基中琼脂的添加量一般为1.5%2.0%

C.液体培养基可用于观察微生物的菌落特征

D.微生物在培养基上生长繁殖时，均不需要调节pH

2.制备牛肉膏蛋白胨培养基时，需要经过“溶化→调pH→灭菌→倒平板”的步骤。下列对该过程的分析，错误的是（）

A.溶化时需用玻璃棒不断搅拌，以防培养基糊底

B.调pH应在培养基溶化后、灭菌前进行

C.灭菌的目的是杀死培养基中的所有微生物，包括芽孢

D.倒平板需在酒精灯火焰旁操作，以防止杂菌污染

3.下列选项中，属于选择培养基的是（）

A.伊红美蓝培养基（用于鉴别大肠杆菌）

B.加入高浓度NaCl的培养基（用于筛选耐盐菌）

C.含蛋白胨、牛肉膏的普通培养基

D.用于培养厌氧菌的液体培养基（添加还原剂）

4.某同学在倒平板时，将培养基倒入培养皿后立即盖上皿盖，冷却后发现培养基表面出现大量冷凝水。可能导致此现象的原因是（）

A.培养基倒入量过多

B.培养皿未灭菌

C.培养基温度过高（高于60℃）

D.倒平板后未在酒精灯火焰旁操作

5.在微生物培养实验中，无菌操作的核心目的是（）

A.防止培养基被微生物污染

B.保证微生物快速生长繁殖

C.提高培养基的营养价值

D.避免实验人员感染病原微生物

二、填空题（每空2分，共20分）

1.培养基是为微生物生长繁殖提供营养物质的基质，其基本成分包括______、______、______、______和______。

2.高压蒸汽灭菌法是实验室最常用的灭菌方法，通常在______kPa（约1.05kg/cm2）压力下，维持温度______℃，灭菌时间为______min。

3.平板划线分离法是通过接种环在固体培养基表面多次划线，将______逐步稀释到培养皿表面，最终得到______的操作。

4.鉴别培养基是在培养基中加入某种指示剂或化学物质，依据微生物生长后产生的______（如颜色变化、沉淀形成等）来区分不同种类的微生物，例如______培养基可通过是否产生黑色沉淀来鉴别产硫化氢的细菌。

三、简答题（每题10分，共30分）

1.简述培养基灭菌的目的及常用灭菌方法，并说明高压蒸汽灭菌法的原理。

2.为什么配制固体培养基后需要冷却至50℃左右才能倒平板？温度过高或过低分别会导致什么问题？

3.某实验小组用未灭菌的涂布器进行涂布平板操作，结果在空白培养基上长出了菌落。请分析出现该现象的可能原因，并提出改进措施。

四、实验设计题（共35分）

题目：从土壤中分离能分解尿素的细菌并计数

实验目的

1.学习从土壤中分离微生物的基本方法。

2.掌握选择培养基的原理及应用，分离能分解尿素的细菌。

3.学会用稀释涂布平板法进行微生物计数。

材料用具

土壤样品、尿素、琼脂、KH?PO?、Na?HPO?、MgSO?·7H?O、葡萄糖、酚红指示剂、无菌水、培养皿、试管、涂布器、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、恒温培养箱等。

实验步骤（请补充完整以下步骤，并回答相关问题）

步骤1：土壤样品的稀释

①称取1g土壤样品，加入盛有99mL无菌水的三角瓶中，充分振荡混匀，得到______倍的土壤悬液；

②吸取1mL上清液，加入盛有9mL无菌水的试管中，混匀，得到10?2稀释液；

③重复上述操作，依次制备10?3、10??、10??、10??的土壤稀释液。

步骤2：选择培养基的配制

①配制基础培养基：按比例称取KH?PO?0.5g、Na?HPO?1.0g、MgSO?·7H?O0.2g、葡萄糖10.0g、琼脂15.0g，加入蒸馏水1000mL，加热溶化；

②加入尿素：待培养基冷却至50℃左右，加入______g尿素，混匀；

③调pH与灭菌：用1mol/LNaOH溶液调节培养基pH至7.07.2，采用______法灭菌，冷却备用；

④加入指示剂：灭菌后，待培养基温度降至50℃左右，加入0.5%酚红指示剂______mL，混匀后倒平板。

步骤3：微生物的接种与培养

①分别吸取10??、10??两个稀释度的土壤悬液各0.1mL，滴加到对应的培养基表面；

②用______在培养基表面轻轻涂布均匀，使菌液分散；

③将