单细胞测序样本采集与处理规范标准立项修订与发展报告.docxVIP

《单细胞测序样本采集与处理规范》标准立项与发展研究报告

EnglishTitle:DevelopmentReportontheStandardizationProjectof“SpecificationsforSampleCollectionandProcessinginSingle-CellSequencing”

摘要

单细胞测序技术作为生命科学领域的革命性工具，能够解析组织内单个细胞的基因组、转录组等多组学信息，在肿瘤学、免疫学、发育生物学及精准医疗等领域展现出巨大潜力。然而，该技术高度依赖于初始样本的质量，尤其是单细胞悬液制备的标准化程度。当前，行业内缺乏统一的样本采集与预处理技术规范，导致实验流程的重复性差、数据可比性低，并造成严重的样本与资源浪费。本报告旨在阐述《单细胞测序样本采集与处理规范》标准立项的背景、目的、核心内容及其战略意义。该标准项目旨在系统规定外周血、组织及贴壁细胞等样本在采集、单细胞悬液制备、分选、保存及运输全流程的技术要求与核心指标。通过建立此基础性技术规范，将有效提升单细胞测序实验的成功率与数据准确性，保障研究成果的科学性与可重复性，对规范市场、推动技术创新、增强我国在生命科学前沿领域的国际竞争力具有至关重要的作用。报告结论指出，该标准的制定与实施是行业发展的迫切需求，并将为后续相关技术标准的体系化建设奠定坚实基础。

关键词：单细胞测序；样本采集；单细胞悬液；技术规范；标准化；预处理；质量控制；生物医学

Keywords:Single-CellSequencing;SampleCollection;Single-CellSuspension;TechnicalSpecification;Standardization;Preprocessing;QualityControl;Biomedicine

正文

一、立项背景与目的意义

单细胞测序技术突破了传统批量测序的局限，首次实现了在单个细胞分辨率上对基因组、转录组、表观基因组等多组学层面的系统性研究。通过与空间转录组、显微切割等技术的结合，它还能揭示细胞在组织中的空间定位与互作网络。自2013年以来，该技术多次被《科学》（*Science*）、《自然》（*Nature*）等顶级学术期刊评为年度突破性技术，正引领着生物医学研究范式的深刻变革，在肿瘤异质性解析、免疫微环境刻画、生殖发育追踪及神经系统研究等领域具有不可替代的应用价值。

然而，单细胞测序“始于样本，成于悬液”。制备高质量的单细胞悬液是整个实验流程和后续数据分析的基石。目前，针对外周血、冷冻/新鲜组织、贴壁细胞等不同样本类型，虽已发展出多种预处理流程，但其成功高度依赖于操作人员的经验水平。在悬液制备过程中，细胞活性（Viability）、细胞得率（Yield）、双联体或多聚体比例（Doublet/MultipletRate）、背景杂质（如红细胞、细胞碎片）含量等关键质量属性（CriticalQualityAttributes,CQAs）直接影响下游分选、建库及测序数据的质量。同时，单细胞分选技术（如流式细胞分选、微流控分选等）的选择也需依据样本特性和研究目标进行优化。

当前行业面临的突出问题是缺乏统一、系统的技术标准。样本采集与预处理方法的随意性导致了实验室内与实验室间结果的重复性（Repeatability）和复现性（Reproducibility）难以保证。这种不规范的操作不仅使得大量珍贵临床样本和科研经费被浪费，也严重阻碍了不同研究机构间数据的整合、比较与共享，制约了该技术从基础研究向临床诊断应用的可靠转化。

因此，立项制定《单细胞测序样本采集与处理规范》具有重大的现实意义与战略价值：

1.提供技术指导：为样本采集、单细胞悬液制备及分选处理的关键环节，提供明确的方法选择依据与核心考量指标的技术指导。

2.建立准入要求：限定单细胞测序样本的准入质量标准，从源头保障实验材料的一致性，从而系统性提高测序实验的成功率与最终数据的准确性。

3.规范市场发展：作为一项基础通用标准，它将为单细胞测序服务提供商、仪器试剂生产商以及科研医疗机构提供统一的操作基准，促进整个产业链的规范、有序和高质量发展。

4.提升国际竞争力：推动建立符合中国国情与研究需求的统一标准，有助于提升我国生命科学研究的整体创新能力与数据产出质量，对于我国在前沿生物技术领域掌握标准话语权具有深远的国际战略意义。

二、范围与主要技术内容

1.范围

本标准规定了单细胞测序样本采集与处理全流程的基本技术要求、操作规范和质量控制指标。本标准适用于开展单细胞测序（包括但不限于单细胞RNA测序、单细胞ATAC测序等）过程中，对待检生物样本的采集、预处理、