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- 2026-02-15 发布于河北
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专题一基因工程
基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技,赋予生物以新的遗
传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工
的,又叫做DNA重组技.
(一)基因工程的基本工具
1“分子手刀”一限制性核酸内切酶(限制酶)
0
(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核甘酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核昔酸之间
的磷酸二酯跳断开,因此具有专一性。
(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。
黏性末端:当限制酹从识别序列的中心轴线两侧切开时,被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有
几个伸出的核甘酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。
平末端:当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切
口叫平末端。
CCC:;(<;(;CCCGGG
Smul*
(;GG:CC(X(X;CCC
中•战
2分子缝合针”--DNA连接酶
0
(1)两种DNA连接酶(E・co//DNA连接酶和T-DNA连接酶)的比较
①相同点:都缝合磷酸二酯键。
②区别:£・co//DNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起
来;而LDNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低.
(2)与DNA聚合酶作用的异同:
DNA聚合酶只能将单个核苛酸加到已有的核甘酸片段的末端,形成璘酸二酯键.DNA连接酶是连接两个DNA片
段的末端,形成磷酸二酯键。
DNA连接酶DNA聚合酶
不同点连接的DNA双捱单链
模板不要模板要模板
连接的对象2个DNA片段单个脱氧核昔酸加到已存在的单链DNA片
段上
相同点作用实质形成磷酸二酯键
化学本质蛋白质
3“分子运输车”一载体
O
(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存.
②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。
③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择.
④对受体细胞无害.
(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的
双链环状DNA分子.
(3)其它载体:\噬菌体的衍生物、植物病毒
(二)基因工程的基本操作程序
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