枸杞干果中腈吡螨酯残留量的测定 液相色谱-串联质谱法.docxVIP

枸杞干果中腈吡螨酯残留量的测定液相色谱-串联质谱法

1范围

本规程规定了枸杞干果中腈吡螨酯（cyanopyrafen）残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。

本规程适用于枸杞干果中腈吡螨酯残留量的定性鉴别和定量测定，方法检出限为0.005mg/kg，定量限为0.01mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。

GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量

GB2760食品安全国家标准食品添加剂使用标准

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T27404实验室质量控制规范食品理化检测

NY/T761蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定

3原理

试样中的腈吡螨酯经乙腈提取，固相萃取柱净化后，采用液相色谱-串联质谱仪进行分离和检测，外标法定量。利用腈吡螨酯的保留时间和特征离子对进行定性鉴别，根据峰面积与浓度的线性关系计算残留量。

腈吡螨酯的基本信息：分子式C18H13ClN2O2，分子量324.76，CAS号128474-98-6，具有特定的母离子和子离子特征，可通过质谱条件优化实现精准检测。

4试剂与材料

除非另有说明，所用试剂均为分析纯或色谱纯，实验用水符合GB/T6682中一级水的规定。

4.1试剂

乙腈（CH3CN）：色谱纯。

甲醇（CH3OH）：色谱纯。

乙酸（CH3COOH）：分析纯。

氯化钠（NaCl）：分析纯，60℃烘干2h，冷却后备用。

无水硫酸镁（MgSO4）：分析纯，60℃烘干4h，冷却后备用。

腈吡螨酯标准品：纯度≥98.0%，编号、生产厂家及有效期清晰可追溯。

乙酸-乙腈溶液（1+99，v/v）：量取1mL乙酸，加入99mL乙腈，混匀备用。

甲醇-水溶液（50+50，v/v）：量取50mL甲醇，加入50mL一级水，混匀备用。

4.2标准溶液配制

标准储备液（1000μg/mL）：准确称取0.0100g腈吡螨酯标准品，置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，置于-18℃冰箱中避光保存，有效期6个月。

标准中间液（10μg/mL）：准确吸取1.00mL标准储备液，置于100mL容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，置于4℃冰箱中避光保存，有效期1个月。

标准工作液：准确吸取适量标准中间液，用甲醇-水溶液（50+50，v/v）逐级稀释成浓度为0.01、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50μg/mL的标准工作液，现配现用。

4.3材料与耗材

固相萃取柱：C18柱（500mg/6mL）或同等性能固相萃取柱，使用前用5mL甲醇和5mL一级水活化。

离心管：50mL，聚四氟乙烯材质，耐有机溶剂。

滤膜：0.22μm，有机相针式滤器。

研磨机：高速组织研磨机，转速可调节。

离心管：10mL，刻度离心管。

5仪器与设备

液相色谱-串联质谱仪（LC-MS/MS）：配备电喷雾离子源（ESI）。

高速冷冻离心机：转速≥8000r/min，温度可调控。

高速组织研磨机：转速≥20000r/min。

电子天平：精度0.1mg和0.001g。

超声波清洗器：功率≥200W，频率40kHz。

氮吹仪：可控温，氮气纯度≥99.99%。

移液器：1mL、5mL、10mL，精度符合要求。

容量瓶：10mL、50mL、100mL，玻璃材质，校准合格。

涡旋振荡器：转速可调节。

烘箱：可调控温度，用于试剂烘干。

6试样制备与保存

6.1试样制备

取样：按照GB/T8855的规定，随机抽取代表性枸杞干果试样，取样量不少于1kg，充分混匀。

粉碎：将混匀后的试样放入高速组织研磨机中，粉碎至均匀粉末（过40目筛），避免样品发热导致农药挥发，粉碎后立即装入洁净的密封容器中，做好标记。

分样：将粉碎后的试样分成两份，一份用于检测，一份作为留样，留样量不少于200g。

6.2试样保存

制备好的试样应置于4℃冰箱中避光保存，检测试样应在24h内完成提取，留样保存期不少于6个月。保存过程中应防止样品受潮、污染和农药残留降解。

7分析步骤

7.1提取

准确称取5.00g（精确至0.001g）粉碎后的枸杞干果试样，置于50mL离心管中，加入20mL乙酸-乙腈溶液（1+99，v/v），涡旋振荡5min，使试样充分浸润。

将离心管放入超声波清洗器中，超声提取20min（温度控制在25±2℃），期间每隔5min涡旋振荡1次，确保提取充分。

提取完成后，加入3g氯化钠和5g无水硫酸镁，立即涡旋振荡3min，充分混匀，静置10min，使水相和有机相分层。

将离心管放入高速冷冻离心机中，800