【2026年整理】第四讲：酶的分离与纯化.pptVIP

第四讲酶的分离与纯化;第四讲酶的分离与纯化;第四讲酶的分离与纯化;4.1、酶的提取和分离纯化;酶的分离纯化一般程序：;4.2、酶的分离纯化策略;2、分离纯化策略;1）目的明确;2）建立一个可靠、快速的分析方法;3）纯化方法的选择;4.3、酶的分离纯化与制备过程;1、材料的预处理;2、细胞破碎（胞内酶）;机械破碎;3、酶的提取;★酶的主要提取方法;讨论：提高酶分子扩散速度手段;4、酶的分离纯化方法;★盐析法;在高浓度盐溶液中，蛋白质的溶解度随盐浓度增加而减少而沉淀而析出，这种现象称为盐析。;★盐析方法：;;;分析盐析的特点及影响因素;★有机溶剂沉淀法;★有机溶剂沉淀法要求：;★有机溶剂沉淀法的特点：;★等电点沉淀法;★有机聚合物沉淀法;★萃取分离;①双水相萃取;★各种双水相系统;利用PEGl500／NaH2PO4体系三步双水相萃取法;②超临界流体萃取;常见超临界流体的超临界点和超临界密度;★最常用超临界流体为CO2;③反胶团萃取;★凝胶过滤（也称凝胶色谱）;★凝胶过滤介质品种：;柱色谱操作：色谱介质的平衡、装柱、加样、扩展(包括洗涤和洗脱)以及与此同时进行的流出液成分(蛋白质或酶活性)的检测和收集。;;撂结桃胞宵纶毕矿帽隐幕轴建幌漂颗郝野泽礼觅鲜僵书诗纲理景妮据剐儡第四讲：酶的分离与纯化第四讲：酶的分离与纯化;★膜分离;★超滤技术;工业上常用超滤膜器