细胞破碎课件.pptVIP

酶消化法的缺點在於酶的價格昂貴限制了在大規模生產中的使用，雖然條件溫和、具有選擇性。細胞懸浮液中加入酶能迅速和細胞壁反應並破壞它們。酶選擇性的催化細胞壁反應，不破壞細胞內的其他物質。堿處理法和酶消化法相反，反應激烈，不具選擇性，而且較便宜。堿加入細胞懸浮液中後和細胞壁進行了多種反應，包括使磷脂皂化。該操作是細胞增溶的很好的例子，因為它使細胞壁的成分溶於表面活性劑，也使蛋白質變性。該法不僅破壞了細胞壁也破壞了產物，因此即便很便宜，堿處理也是一種很不常用的方法。A、(滲透衝擊法)三種主要細胞破碎化學方法中最簡單的是滲透衝擊法。此法將一定體積的細胞液加到2倍體積的水中，細胞中溶質濃度高，水不斷進入細胞，使細胞膨脹，最後導致破裂。細胞破裂後釋放到周圍環境中的胞內物可用後面章節介紹的方法分離。細胞破碎的難易決定於其類型，紅血球細胞容易溶破，動物細胞只有當其組織被用4.3節所介紹的方法機械切碎或勻漿後才易溶破。植物細胞很難溶破，因為植物細胞中含有大量的木質成分，通過滲透流很難滲透。滲透流的動力來自滲透壓，滲透壓可能很大。可以通過化學平衡來估算，水的化學電勢是常數，即：μH20(outside)=μH20(inside)(4.2-1)細胞外純水的化學電勢包括標準化學電勢和壓力修正項；與之平衡的胞內的化學電勢包