深度解析SSR实验原理与操作技巧.pptVIP

SSR分析的原理和操作技术PPT讲座;DNA分子标识技术类型;SSR介绍;SSR介绍;SSR标识的基本原理;SSR标识的基本原理;第7页;第8页;PCR技术的基本原理;;第11页;PCR反应体系;PCR反应体系;PCR循环条件;PCR条件优化;电泳原理;电泳介质;聚丙烯酰胺凝胶;第19页;聚丙烯酰胺凝胶;用聚丙烯酰胺凝胶电泳对扩增产物进行检测时，通常PCR产物在变性聚丙烯酰胺凝胶上分离效果优于非变性胶。因为杂合个体在PCR后期的循环中会产生异源双链分子，造成在杂合的情况下胶中产生了3条带甚至是4条带，而不是正常的2条带。这种情况出现会干扰等位基因的统计。

;染色方法与原理;载样缓冲液（loadingbuffer）;试验方法与环节;2.配制SSR扩增的反应液：;3.SSR-PCR;4.制备5％的变性聚丙烯酰胺凝胶：;5.电泳样品的准备：在PCR产物中加入8μL的loadingbuffer混合，得到混合物，95℃加热3min，快速置于冰上冷却，然后点样。

6.电泳：每个点样孔中，点加适量的混合物（4μL），每排梳孔中最左边的梳孔用于点加DNAMarker（分子量标识物），方便计算分子量，以300V电压进行恒压电泳，电泳液为0.5×TBE，待溴酚蓝条带泳动至胶板底端时停止电泳。;7.染色;8.观察