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载脂蛋白E在神经细胞中表达对细胞功能的影响 蒋 莉 南京医科大学动脉粥样硬化研究中心 阿尔茨海默病 (Alzheimer’s disease， AD) 进行性的大脑退行性疾病 以记忆和其他认知功能衰退直至发展为严重痴呆为特征，也是老年期痴呆中最常见的类型之一。 AD主要病理学特征 老年斑 神经原纤维缠结 神经元丢失 研究背景 E2 E3 E4 112 Cys Cys Arg 158 Cys Arg Arg 不同表型的apoE 在有β-VLDL存在时，对神经细胞突起的生长具有不同效应：apoE3可促进神经生长而apoE4抑制神经生长。 apoE4可影响细胞溶酶体膜的稳定性，从而加剧淀粉样蛋白Aβ引起的溶酶体破坏，从而导致细胞的死亡。 细胞内表达的apoE尤其是截断的apoE4可与tau结合而引起神经原纤维缠结的形成 。 表达人apoE4的转基因小鼠也出现了tau蛋白过磷酸化，神经原纤维缠结增加的现象 。 脑内的apoE主要由星型胶质细胞、小胶质细胞合成和分泌，但近年来的研究显示其他类型的细胞如神经细胞、少突胶质细胞等也有apoE mRNA的表达，并且在脑损伤、退行性变和AD病人脑内apoE的表达明显增强。 设想： 能否使apoE4在神经细胞中过表达，以建立神经保护药物的筛选模型。同时，探讨apoE4在AD发病中的相关机制。 * * 研究背景 研究背景 AD发病率 (%) apoE多态性 研究背景 研究背景 研究背景 研究方法 筛选 转染SK-N-SH 定位观察 表达鉴定 功能分析 构建真核表达质粒 重组pEGFP-apoE质粒酶切电泳图 apoE3 Query: 321 cgcaggcccggctgggcgcggacatggaggacgtgtgcggccgcctggtgcagtaccgcg 380 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | Sbjct: 398 cgcaggcccggctgggcgcggacatggaggacgtgtgcggccgcctggtgcagtaccgcg 457 ? Query: 381 gcgaggtgcaggccatgctcggccagagcaccgaggagctgcgggtgcgcctcgcctccc 440 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | Sbjct: 458 gcgaggtgcaggccatgctcggccagagcaccgaggagctgcgggtgcgcctcgcctccc 517 ? Query: 441 acctgcgcaagctgcgtaagcggctcctccgcgatgccgatgacctgcagaagcgcctgg 500 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | Sbjct: 518 acctgcgcaagctgcgtaagcggctcctccgcgatgccgatgacctgcagaagcgcctgg 577 ? apoE4 Query: 332 cgcaggcccggctgggcgcggacatggaggacgtgcgcggccgcctggtgcagtaccgcg 391 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | Sbjc