食品中维生素C和维生素B1的测定.pptVIP

实验三 食品中维生素C的测定实验四 食品中维生素B1的测定 一、实验目的 食品中的抗坏血酸有三种类型：即有生理价值的还原型、脱氢型以及无生理价值的二酮古洛糖酸。新鲜食品中的抗坏血酸主要是以还原型的形式存在，测定还原型抗坏血酸可粗略了解该食品中抗坏血酸浓度的高低。 二、基本原理 2，6— 二氯靛酚染料在中性或碱性溶液中呈兰色，在酸性条件下呈粉红色。还原型抗坏血酸（Vc）能定量还原兰色染料2，6— 二氯靛酚，被还原后即失去红色，当被测溶液中过量一滴染料时即显粉红色，以示终点。抗坏血酸还原染料后，本身被氧化为脱氢型抗坏血酸，在无杂质干扰时，根据一定量样品提取液还原标准染料的体积，可计算样品中还原型抗坏血酸的含量。 三、实验器材 1. 仪器：果汁机；大、小烧杯（250 mL、50 mL）；锥形瓶；100 mL具塞量筒；5 mL移液管；微量滴定管；漏斗、滤纸、吸耳球等。 2. 试剂： （1）2%草酸：溶解20克草酸结晶于200毫升水中，然后稀释至1000mL。 （2）1％草酸溶液：取上述2％草酸溶液500mL，用水稀释至1000mL。 （3）1％淀粉溶液。 （4）6％碘化钾溶液。 （5）0.1000N碘酸钾溶液：精确取干燥的碘酸钾0.100ml。0.3567克用水稀释至100mL. （6）0.0010N碘酸钾溶液：吸取0.1N碘酸钾溶液1mL，用水稀释至100毫升。此溶液1mL相当于抗坏血酸0.088mg。 （7）抗坏血酸标准溶液：准确称取20mg抗坏血酸，溶于1％草酸溶液中，移入l00mL量瓶中，并用1％草酸溶液稀释至100毫升，混匀，置冰箱中保存 使用时吸取上述抗坏血酸5ml，置于50毫升容量瓶中，用1％草酸溶液定容之。此标准使用液每毫升含0.02mg维生素C。 标定：吸取标准使用液5mL于三角烧瓶中，加入6％碘化钾溶液0.5mL，1％淀粉溶液3滴，再以0.001N碘酸钾标准溶液滴定，终点为淡蓝色。 计算如下： ?抗坏血酸浓度（mg/mL）= V1——滴定时所耗0.0010N碘酸钾标准溶液的量(mL)； V2——所取抗坏血酸的量(mL)； 0.088——lml 0.0010N碘酸钾标准溶液相当于抗坏血酸的量(mg／mL) （8）2，6— 二氯靛酚溶液：称取碳酸氢钠52mg，溶于200ml沸水中，然后称取2.6-二氯靛酚50mg，溶解在上述碳酸氢钠的溶液中，待冷，置于冰箱中过夜，次日过滤置于250mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此液应贮于棕色瓶中并冷藏，每星期至少标定1次。 标定方法：取5mL已知浓度的抗坏血酸标准溶液，加入1％草酸溶液5mL，摇匀，用上述配制的染料溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒不褪色为止 每毫升染料溶液相当于Vc的毫克数 T= 式中： ??? C——抗坏血酸(V)的浓度(mg／mL)； ??? Vl——抗坏血酸的量(mL)； ??? V2——消耗染料溶液量(mL)。 四、操作步骤 1. 称取适量(50.0-100.0克)样品，加等量的2％草酸溶液，倒入组织捣碎机中捣成匀浆； 2. 称取10.00-20.00克匀浆(使其含有抗坏血酸1-5mg)，置于小烧杯中，小心地以1％草酸溶液将样品移入100毫升量筒中，并稀释至刻度，摇匀，静置，过滤； 3. 将样液过滤，弃去最初毫升滤液。若样液具有颜色，用白陶土(应选择脱色力强但对抗坏血酸无损失的白陶土)去色，然后迅速吸取5-l0ml滤液，置于50ml三角烧瓶中，用标定的2.6-二氯靛酚染料溶液滴定之,直至溶液呈粉红色于15秒内不褪色为止； 4. 用蒸馏水作空白滴定，如染料浓度过高，应适当稀释。 5. 计算 还原型抗坏血酸（mg/100g）＝ 式中： V1——样品滴定时所耗去染料溶液的量(mL)； V2——空白滴定时所用染料mL数； T ——l mL染料溶液相当于抗坏血酸标准溶液的量(mg)； W：滴定时所用样品稀释液中含样品量(g)。 五、实验分析与讨论 1.样品测定过程中，操作时间对实验结果有否影响，为什么？ 2.计算式中W应如何换算？ 3.食品中Vc的测定过程中，为了减少误差，应注意哪些问题？ 实验四 食品中维生素B1的测定 一、实验目的 1. 了解食品中维生素B1测定的意义与原理； 2. 了解荧光分光光度计的使用方法及注意事项； 3. 掌握食品中维生素B1的测定方法； 二、基本原理 硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中被氧化成噻嘧色素，在紫外线下，噻嘧色素发出荧光。在给定的条件下，以及没有其他荧光物质干扰时，此荧光之强度与噻嘧色素量成正比，即与溶液中硫胺素量成正比。 如样品中含杂质过多，应经过离子交换剂处理，使硫胺素与杂质分离，然后以所得溶液作测定。 三、实验器材 1. 仪器：荧光分光光度计；盐基交换管；Maizel－Gerson反应瓶 2