固氮菌在农业生产中的应用研究.doc

【标题】固氮菌在农业生产中的应用研究 【作者】窦 娇 【关键词】固氮菌??农业生产??应用现状??联合固氮 【指导老师】王 庆 【专业】生物 【正文】1?引言随着环境问题日益成为全世界关注的焦点，人类逐渐认识到，可持续发展的科学内涵。发展环境友好型、资源节约型的社会成为目前重要的战略目标。当然，农业的发展也是如此，农业发展既要增加农作物产量，又不能破坏土地的持续生产力和生态环境。然而，过度地施用和依赖化学氮素肥料，给农业生产和生态环境带来了巨大的负面影响，也不符合可持续发展的要求。因此，在可持续发展日益成为世界各国的共识之际，人类再次把目光投向了生物固氮[1]。国内外许多专家、学者对固氮菌及固氮菌肥在农业生产的各个领域的应用分别进行了研究。2?固氮菌及固氮菌肥的概况2.1?固氮菌的概况2.1.1?固氮菌的含义能够直接固定空气中的氮气为氮素营养的细菌称为固氮菌（Azotobacter）。2.1.2?固氮菌的种类按固氮菌与植物之间的相互关系，可将固氮菌分为三大类[2]：第一类是与高等植物共生的，称为共生固氮菌。共生固氮微生物只有和植物互利共生时，才能固定空气中的分子氮。共生固氮微生物可以分为两种：一种是与豆科植物互利共生的根瘤菌，以及与桤木属、杨梅属、和沙棘属等非豆科植物共生的弗兰克氏放线菌（Frankia）；另一种是与红萍（又称做满江红）等水生蕨类植物或罗汉松等裸子植物共生的蓝藻。由蓝藻和某些真菌形成的地衣也属于这一类。第二类为自生固氮菌。自生固氮微生物在土壤或培养基中生活时，可以自行固定空气中的分子态氮，对植物没有依存关系。常见的自生固氮微生物包括以圆褐固氮菌（Azotobacter chroococcum）为代表的好氧性自生固氮菌、以梭菌为代表的厌氧性自生固氮菌，以及以鱼腥藻、念珠藻和颤藻为代表的具有异形胞的固氮蓝藻（异形胞内含有固氮酶，可以进行生物固氮）。第三类是70年代发现的，可与多种作物，尤其是一些C4禾本科植物根际形成松散联合共生的一些固氮微生物，通常称为联合固氮微生物。如固氮螺菌（Azaspirillum）、雀稗固氮菌（Azotobacter paspali）等，能够生活在玉米、雀稗、水稻和甘蔗等植物根内的皮层细胞之间。这些固氮微生物和共生的植物之间具有一定的专一性，但是不形成根瘤那样的特殊结构。这些微生物还能够自行固氮，它们的固氮特点介于自生固氮和共生固氮之间。2.1.3?固氮菌固氮的原理虽然固氮菌根据固氮能力分为以上三类，但总的来说都遵循同一个原理。生物固氮是固氮微生物特有的一种生理功能，这种功能是在固氮酶的催化作用下进行的。固氮酶是一种能够将分子氮还原成氨的酶。固氮酶由两种蛋白质组成：一种含有铁，叫做铁蛋白，另一种含有铁和钼，叫做钼铁蛋白。只有铁蛋白和钼铁蛋白同时存在，固氮酶才具有固氮的作用。生物固氮过程可以用下面的反应式概括表示：?分析上面的反应式可以看出，分子氮的还原过程是在固氮酶的催化作用下进行的。有三点需要说明：第一，ATP一定要与镁（Mg）结合，形成Mg-ATP复合物后才能起作用；第二，固氮酶具有底物多样性的特点，除了能够催化N2还原成NH3以外，还能催化乙炔还原成乙烯（固氮酶催化乙炔还原成乙烯的化学反应，常被科学家用来测定固氮酶的活性）；第三，生物固氮过程中实际上还需要黄素氧还蛋白或铁氧还蛋白参与，这两种物质作为电子载体能够起到传递电子的作用。铁蛋白与Mg-ATP结合以后，被黄素氧还蛋白或铁氧还蛋白还原，并与钼铁蛋白暂时结合以传递电子。铁蛋白每传递一个e-给钼铁蛋白，同时伴随有两个Mg-ATP的水解。在这一催化反应中，铁蛋白反复氧化和还原，只有这样，e-和H+才能依次通过铁蛋白和钼铁蛋白，最终传递给N2和乙炔，使它们分别还原成NH3和乙烯[3]。如下图所示：?生物固氮示意图由于全部固氮过程都是生物活动，无污染物排放，有利于保护生态环境。同时，由于减少和免除了化学氮素的投入，使农产品中硝酸和亚硝酸物质大幅度下降，提高了农产品的品质，减少致癌物质对人类的危害。　　2.1.4?固氮菌的制备微生物肥料已经在现代农业科技上大量投入应用。要获得高效的固氮菌肥，就应该有良好的固氮菌种。因此，纯性固氮菌的制备非常重要。固氮菌的制备方法参见吴鹰的《固氮菌的制备》[4]。固氮菌制备好以后，将它培养成细菌肥料，加到土壤中便可提高土壤肥力，使植物获得更好的营养，从而提高农作物产量。固氮菌肥料是我们在全球农业中大力推广使用的一种优良菌肥。2.2?固氮菌肥的概况2.2.1?固氮菌肥的含义固氮菌类肥料是指能在土壤和很多作物根际中同化空气的氮气，供应作物氮素营养，又能分泌激素刺激作物生长的一类微生物肥料[5]。2.2.2?固氮菌肥的种类目前，微生物肥料的种类很