红霉素及罗红霉素的光度分析研究.doc

【标题】?红霉素及罗红霉素的光度分析研究 【作者】杨晓练 【关键词】??光度分析法??红霉素??罗红霉素??茜素红 【指导老师】江虹 【专业】化学教育 【正文】1?引言红霉素（ERC）及罗红霉素（ROC）属大环类酯类抗生素，其结构特征为分子中有一个类酯结构的十四或十六元大环。这两种抗生素的抗菌谱和抗菌活性相近似，对革氏兰阳性菌和某些阴性菌、支原体等有较强的作用；而且在临床上这两种药物常常作为青霉素过敏患者治疗溶血性链球菌、肺炎链球菌、及慢性咽炎、尿道炎及敏感细菌引起的皮肤组织感染等疾病的替代用药品，因为它们与临床常用的其他抗生素之间无交叉耐药性，而且毒性都较低，无严重不良反应。不仅如此ERC及其衍生物ROC还用作兽药。ROC是在ERC结构基础上改进得到的，它具有更为广泛的抗菌谱。目前，测定ERC及衍生物的方法主要有微生物法[1]、荧光光度法[2]、薄层色谱法[3]、液相色谱法[4]、液质联用技术（LC-MSn）法[5]及毛细管电泳法[6]（CE）、分光光度法[7]等。Khashaba?采用荧光光度测定法测定了散装药物中的ERC、ROC、地红霉素等几种大环类酯类抗生素[5~6]，该种方法所用仪器费用较高，不易普及。就微生物法而言，刘葆林等人采用微生物效价法测定注射用阿奇霉素含量[8~9]，发现该法有其多种局限性（烦琐、费时、受外界影响因素多、操作条件苛刻）。其它方法（除分光光度法外）也存在不易普及的问题。本文运用分光光度法研究了茜素红（ALR）与红霉素或罗红霉素的反应，发现它们在一定的酸度条件下，生成具有正负吸收峰的红色络合物，其最大正吸收波长为 416 nm（ERC）和 414nm（ROC），线性范围为0～8.81mg/L（ERC）和? 0～10.04mg/L（ROC），表观摩尔吸光系数为 1.28×10 4Lmol.-1.cm-1（ERC）和1.17× 10 4Lmol.-1.cm-1（ROC）；最大负吸收波长为524 nm（ERC）和504nm（ROC）；线性范围为 0～8.90mg/L?（ERC）和0～10.03 mg/L（ROC），表观摩尔吸光系数为 1.02×10 4L?mol.- 1?cm-1?（ERC）和1.37×10 4L?mol.- 1?cm-1（ROC）； ERC和ROC在一定浓度范围内呈良好的线性关系，符合比耳定律，由此建立了测定红霉素和罗红霉素的分光光度法。这种方法快速、简便、灵敏和选择性均较高。ERC和ROC的回收率分别为98.5%和98.9%。?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????2?实验部分2.1仪器和试剂721?型分光光度计(上海分析仪器厂)；PHS-3C?型酸度计(上海第二分析仪厂)；UV-4100型紫外-可见-近红外分光光度计(日本日立公司)红霉素（Erythromycin，简写为ERC；中国药品生物制品检定所提供）、罗红霉素（Roxithromycin，简写为ROC，中国药品生物制品检定所提供）标准溶液：1.0?×10?-3 mol/L储备液，1.0?×10?-4 mol/L?的工作溶液；茜素红（Alizarin red，简写为ALR）；溶液：1.0?×10?-3 mol/L；HAc-NaAc缓冲溶液（取1 mol/ L?的醋酸钠和1 mol/ L?的醋酸溶液按一定比例配成不同PH值的缓冲溶液）；表面活性剂：乳化剂OP 1％；溴化十六烷基三甲基铵(CTMAB) 0.5 g／L；十二烷基硫酸钠l0 g／L；十二烷磺酸钠0.5 g／L；无水乙醇。除ERC和ROC标准样品为生化试剂外，其余试剂均为分析纯，试验用水为二次蒸馏水。2.2试验方法在10 mL?比色管中,依次准确地加入一定量的1.0×10?-4 mol/L ERC（或ROC）标准溶液，1.0?×10?-3 mol/L ALR溶液1.5mL，pH=5.07（ROC的pH=5.35）的HAc-NaAc缓