蔬菜中亚硝酸盐的光度测定.docVIP

【标题】蔬菜中亚硝酸盐的光度测定 【作者】夏 云 霞 【关键词】蔬菜??亚硝酸盐含量??污染? 【指导老师】 【专业】生物科学 【正文】1?引言1.1研究现状随着分析化学新方法和新技术的不断出现和发展，蔬菜中亚硝酸盐的检测方法也更加多样化，新的检测方法层出不穷。到目前为止主要有以下几种：1)光度法：包括格里斯试剂比色法[1]、催化(褪色)光度法和分光光度法[2-5]、流动注射系统-分光光度法、顺序注射系统?-?分光光度法和导数光度法等[6]；2)示波极谱法[2];3)荧光法[6]；4)离子色谱法[7]；5)催化动力学法、气相色谱法以及各种联用技术等[8]。光度法在测定肉类食品与果蔬制品中亚硝酸盐残留量中占据了十分重要的地位。目前，光度法测定亚硝酸盐的方法除经典的格里斯(Griess)试剂比色法及其改良法和盐酸萘乙二胺比色法外，还有一些报道如催化(褪色)光度法、流动注射系统-分光光度法、顺序注射系统-?分光光度法、导数光度法等。本研究测定亚硝酸盐的方法是盐酸萘乙二胺比色法。盐酸萘乙二胺比色法的原理[9]：在弱酸性溶液中，NO2-与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物后，再与盐酸奈乙二胺偶联生成紫红色的偶氮染料，用分光光度法在538nm处测定，与标准曲线比较定量。其原理与格里斯试剂比色法相似，但是此法用的试剂和显色反应的稳定性较差，易受温度和显色时间的影响，并且所用试剂已被确认有明显的致癌作用。所以现在用得较少。通过实验发现：在进行蔬菜样品中亚硝酸盐提取时，提取的最佳条件是在沸水浴提取15min左右；样品中加入2g活性炭，能有效的排除色素和抗坏血酸对亚硝酸盐测定造成的干扰；显色剂先加入对氨基苯磺酸溶液，3min后加入1mlN-1-奈乙二胺盐酸溶液，使显色稳定。流动注射-分光光度法以及后来的顺序注射-分光光度法在食品检测上的应用，开创了分光光度法检测技术的新局面。20?世纪末到21?世纪初期，国外有很多研究者如Ahmed?等,Andrade，Raquel等，Ferrira等,Monser等，Pinho等，Velasco-Arjona等都研究探索了流动注射分析(Flow　InjectionAnalysis,FIA)在肉制品中亚硝酸盐残留检测上的应用，取得了一定的成果。由于流动注射分析有一定的限制，于是Oliveira等?(2004)首次提出了顺序注射分析(Sequential　Injection　Analysis,SIA)这一概念，该分析系统用于食品中亚硝酸盐的检测具有自动化程度高、反应物消耗低、废弃物生成少以及永久的在线再造还原柱，不需离线调节就可以保证最大的转换效率等优点，因此可以替代流动注射分析。这一前景看好的方法早在1995?年就应用于环境水中亚硝酸盐与硝酸盐的检测上。Zhao　Yao-qiang等?(2002)研究了序列注射分析(SIA)检测水中的亚硝基氮。2004年Oliveira等的实验确认了其用于肉制品中的可行性。此外，导数法与紫外分光光度法相结合(导数光度法)，拓宽了紫外分光光度法测定NO2-和NO3-的领域。导数光度法是根据光吸收(或透过)对波长求导所形成的光谱进行定性或定量分析的方法。比光谱导数法是Salinas等人于1990年首次提出的，该法灵敏度高、快速简单、选择性显著(?适用于浑浊试样)，高阶导数能分辨重叠光谱，甚至提供“指纹”特征，因而特别适用于消除干扰和各组分同时测定，在食品分析中的应用十分活跃，尤其是食品中混合组分含量测定。戈早川等?(1999)将标准加入法和偏最小二乘法相结合，提出了一种新的直接同时测定卤肉制品中NO2-、NO3-?的紫外导数分光光度法。该法的吸收光谱与常规吸收光谱比较，有较大的红移，可消除或减少卤肉制品中杂质的干扰，且灵敏度高，简便快速、准确实用。近年来，第二衍生光波紫外/?可见光度法和光学流动探测器应用于测定硝酸盐的研究颇多，成为紫外/可见分光光度法中的一个新亮点。总之，传统分光光度法和各种高效分离方法，如与色谱法、毛细管电泳的联用和与仿生学、化学计量学、动力学和流动分析的的结合将是光度分析最具前景的发展方向，同时也会给亚硝酸盐和硝酸盐的检测技术带来一场又一场革命。催化(褪色)光度法(Catalytic　DiscolorationSpectrophotometry)的原理：基于NO2-?在稀磷酸溶液中催化Evan’s　Blue(依文思蓝)-?氯酸钾氧化还原反应，利用硫酸介质中NO2-催化氯酸钾氧化吖啶橙的褪色反应，建立了微量NO2-?的催化光度法用于肉制品中亚硝酸盐的测定，与国家标准方法比较相符。该方法适用范围广、无毒、灵敏度高、选择性好，而且设备简单、操作方便，改变了现行国家标准中使用α-?萘胺致癌物作显色剂的不利现状。一般来说，影响催化(褪色