【毕业论文】灰棕紫泥土反硝化酶动力学研究.docVIP

【标题】灰棕紫泥土反硝化酶动力学研究 【作者】汪雪 【关键词】?土壤亚硝酸还原酶??动力学参数??灰棕紫泥 【指导老师】李昌满 【专业】生物科学 【正文】1引言土壤酶是由微生物、动植物活体分泌和动植物残体、遗骸分解释放于土壤中的一类具有催化能力的生物活性物质，根据作用原理可以分为水解酶类、氧化还原酶类、转移酶类、裂合酶类4大类[1]。土壤反硝化酶属于氧化还原酶类，是一类参与土壤反硝化作用的酶类。土壤反硝化作用是指在缺氧的条件下通过反硝化酶类的催化作用，将硝酸盐或亚硝酸盐还原为气态分子氮或气态氮氧化物的过程[2]。关于土壤酶的研究历史可以追溯到19世纪末 Woods发现过氧化氢酶，并指出它来源于植物腐解。Ksnig、May和Gile曾正式测定过氧化氢酶的活性。1910年Fermi曾检测土壤中的蛋白酶和当时已知的其它酶。以后脱氨基酶、磷酸酶和亚硝酸还原酶等相继被检测出来。19世纪50年代以后，由于植物和生物化学以及其它学科研究的进步，许多这方面的理论成果及方法等被引人土壤酶学的研究，从而加深了对土壤酶促反应方面的认识，开始应用土壤酶学方面的知识解决现代农业中出现的问题和环境的问题。德国的Koepf H、苏联的Gal- styan A、捷克斯洛伐克的Drobnik J等对土壤酶的研究均做出了重要的贡献。土壤酶来源主要有4种途径：微生物、土壤动物、植物根系和植物残体[3]。Hofmann在1959年的试验表明，将土样保持一年左右，转化酶和β-糖苷酶的活性几乎没有变化[4]。Tabatabai研究土壤腐殖质与酶活性的相互作用，认为在腐殖质含量高的土壤中，土壤酶主要是以腐殖质一酶复合体的形式存在[5]。Kandeler的研究表明，土壤木聚糖酶和转化酶的活性与土壤粒径密切相关土壤有机质存在的状况，氮、磷、钾的形态和含量，都与土壤酶活性变化相关。可以根据土壤酶活性变化，来判断土壤有机质存在的状况[6]。我国对土壤酶的研究始于20世纪60年代初期，主要研究土壤酶与土壤微生物的关系、耕作技术对土壤酶的影响及土壤酶与植物生长的关系，仅发表少量研究报告[7]。从1970年开始，土壤酶研究涉及的土壤有白浆土、黑土、棕壤、褐土、栗钙土、黑垆土、灰钙土、潮土、黄棕壤、红壤、黄壤、紫色土、石灰岩土和水稻土等十几种土壤，研究内容既联系微生物性质研究土壤酶活性，也特别注意研究一些土壤积累酶的特性，探讨了土壤酶与其它肥力因素的关系，同时用土壤酶评价农业管理措施的效果，鉴别土壤类型和肥力水平[8]。研究的土壤酶种类有过氧化氢酶、多酚氧化酶、亚硝酸还原酶、蛋白酶、磷酸酶、脱氢酶和蔗糖酶等。20世纪80年代中期以后，随着环境科学的发展，土壤酶对废水、废物的降解作用受到普遍关注，金属元素对土壤酶的影响也备受生态学家的重视。目前，国内对农田生态系统的土壤酶研究较多，如：与碳、氮、磷转化相关的几种土壤酶在剖面的分布特点，农业管理措施对土壤酶活性的影响及土壤酶活性与土壤其它肥力因子的相关性的研究。土壤酶在环境污染治理中的作用也进行了初步探讨，并报道了废水、废物中金属元素对土壤酶的影响[9]。土壤微生物及其生物活性常常被作为自然和农业生态系统中土壤胁迫过程或生态恢复过程的早期敏感性指标，尤其是80?年代末以来，土壤酶作为土壤质量的生物活性指标，一直是土壤酶学的研究重点[10]。反硝化作用是含氮化合物在土壤中的转化途径之一，也是土壤酶代谢的中心环节之一。参与反硝化作用最重要的两种酶就是硝酸还原酶和亚硝酸还原酶，硝酸还原酶是催化NO3-还原为NO2-的专性酶，亚硝酸还原酶是催化NO2-还原为气态氮氧化物的专性酶[11]。????硝酸盐在土壤中停留时间短，在硝酸还原酶作用下很快就转化为亚硝酸盐，亚硝酸盐是一个支点，从这一点可转向同化性反硝化形成羟胺，再还原为氨，被植物所吸收利用，还可以转向异化性反硝化，生成一氧化二氮或者氮气。通常异化性反硝化使硝酸盐或亚硝酸盐还原成一氧化二氮和氮气，从而不但降低了土壤中氮素营养的含量，对农业生产不利，而且一氧化二氮是温室气体之一，其产生的N2O温室效应是CO?的200倍?，并且对臭氧层有破坏作用，导致1980～1990年间地球紫外线辐射大约增强了6%。黄树辉、吕军研究了硝化和反硝化对N2O产生的贡献研究，用同位素标组成变化和N13标记法来评价硝化和反硝化对N2O释放通量的贡献，探索区分N2O生成贡献的完善方法能合理估算土壤对大气N2O的排放量，研究表明N20的来源可通过使用选择性抑制剂、杀菌剂以及加入的标记底物确定。?这样有利于利用控制农田土壤对大气排放N2O，减少环境风险，保护地球自然环境[12]。史奕、黄国宏研究了土壤反硝化酶活性变化与N2O排放的关系，该研究旨在通过定期测定土壤硝酸还原酶和亚硝酸还原酶的活性