细菌学总论课件_噬菌体.pptVIP

噬菌体 噬菌体的生物学性状 噬菌体的生物学性状 Infection of host cell by T2 phage 噬菌体的生物学性状 噬菌体与细菌的关系 噬菌体与细菌的关系 噬菌体与细菌的关系 吸附和穿入 生物合成 生物合成 成熟和释放 毒性噬菌体的溶菌现象 噬 斑 噬菌体与细菌的关系 噬菌体与细菌的关系 噬菌体与细菌的关系 噬菌体与细菌的关系 噬菌体与细菌的关系 噬菌体增殖规律的描述方法 噬菌体的应用 复习思考题 温和噬菌体可有三种存在状态： 游离的具有感染性的噬菌体颗粒（溶菌周期） ?前噬菌体（溶源周期） 宿主菌细胞质内类似质粒的噬菌体核酸（游离） 噬菌体效价的测定 效价指噬菌体悬液的浓度。即噬菌体数/ml样品。 斑点试验法 液体稀释管法 双层平板法 单层平板法 快速玻片法 45C培养 涂布菌液液 · · ·· 点样 · · 噬菌斑 斑点试验法 液体稀释管法 试样（ 未知效价的噬菌体液） 培养液和宿主细胞 计数管中完整宿主细胞数 （定时取样对活细胞计数） 噬菌体数=原细胞数 — 活细胞数 双层平板法 琼脂平板 菌液+噬菌体试样+琼脂培养基 培养10天 计数噬菌斑 噬菌斑数=试样中噬菌体数 快速玻片法 试样+宿主细胞 +琼脂培养基 低倍镜下计数噬菌斑 充分混匀 短期培养 布在灭菌玻片上 * * * 一.概述 噬菌体是吃细菌的东西，其实它是侵染细菌、真菌、放线菌、螺放体等微生物的病毒。是专性细胞内寄生，噬菌体颗粒可以在细菌细胞外存在，但只能在细胞内繁殖（即遗传物质一定要进入细胞才能复制）。 噬菌体在自然界广泛存在。 形态结构、大小 1.大小以nm计，需电镜观察。 2.形态：蝌蚪形（复合体），微球形 （20面体），丝形。 蝌蚪形由20面体头部和连接螺旋状尾部复合而成，尾部能收缩，有尾鞘或没有尾鞘，可有尾板或尾丝相连。尾部作用是帮助遗传物质注入细胞。 形态结构、大小 3.?? 结构： 由核酸Pr组成。头部内含核酸，Pr构成衣壳，包括尾部。 核酸：DNA或RNA 单链或双链，线性或环状（多数线性双链） 衣壳：保护遗传物质和帮助侵染新的宿主的作用 Head/Capsid Base Plate Tail Fibers Contractile Sheath Tail 抗原性 抵抗力 噬菌体具有抗原性，能刺激机体产生抗体，抑制相应噬菌体感染细菌。但对已吸附或进入宿主菌的噬菌体不起作用。 大于一般细菌 抵抗乙醚、氯仿和乙醇 75℃ 30min或更久才能被灭活 耐受低温和冰冻 但对紫外和X射线敏感，一般经紫外照射 10~15min即失去活性。 严格的寄生性（宿主特异性） 只寄生在易感宿主体内，即一种噬菌体只能在相对应的细菌内增殖，如伤寒沙门菌噬菌体只能感染伤寒沙门菌，而不能感染其它种的沙门菌（变形杆菌）。 这种特异性的根据是细菌表面所存在的噬菌体受体。 裂解作用 噬菌体感染宿主局后可出现两种结果，其一是裂解细菌，完成溶菌周期（裂解周期），这种噬菌体称毒性噬菌体。 毒性噬菌体：就是能在宿主菌细胞内复制增殖，产生子代噬菌体，达到一定数量后，使细菌裂解的噬菌体。 裂解作用 增殖方式：复制 增殖过程： 吸附 穿入 生物合成 成熟和释放 有尾噬菌体通过尾刺或尾丝特异地吸附在敏感细菌表面的相应受体上（是Pr或多糖），两者接触后，噬菌体尾板上的少量水解酶溶解宿主细胞壁肽聚糖形成小孔，然后尾鞘收缩，将头部中核酸经尾鞘小孔注入细菌细胞内，Pr外壳留在菌体外。 细菌不再复制自身DNA，而受噬菌体DNA携带的遗传信息所控制。利用细胞的合成机构，如核糖体、tRNA、酶、ATP等，以噬菌体DNA为模板，复制子代噬菌体DNA，同时在不断合成子代噬菌体的外壳Pr。 RNA多聚酶的转录 胞浆内核Pr体转译? 亲代DNA mRNA 早期Pr（功能Pr） 复 制? 转录 转译 子代DNA 晚期mRNA 晚期Pr（噬菌体 衣壳与其它结构Pr） 子代DNA与子代外壳Pr在细菌细胞质内装配成完整的子代噬菌体。 当子代噬菌体增殖到一定数量（20-1000个）时（噬菌体晚期基因可编码合成一种溶菌酶），使细菌裂解，噬菌体释放游离，又可去感染另外的细菌。称溶菌周期，约25min。 毒性噬菌体感染敏感菌后可出现溶菌现象，如果细菌在液体培养基中生长繁殖成半透明的菌悬液，感染后，便澄清。 在固体培养基中，若用适量噬菌体