医学论文：hplc-elsd法测定耳聋左慈丸中熊果酸的含量.docVIP

hplc-elsd法测定耳聋左慈丸中熊果酸的含量 【摘要】? 目的 建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法(hplc-elsd)测定耳聋左慈丸中熊果酸的含量。方法 色谱柱vp-ods c18；以甲醇-0.5%醋酸(9010)为流动相；流速：0.8 ml/min。结果 熊果酸在63～630 μg/ml范围内呈良好线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率为98.11%(rsd=1.14%)。结论 本法简便、准确、重现性好,可用于该制剂的含量测定。 【关键词】? 耳聋左慈丸；熊果酸；高效液相色谱-蒸发光散射检测法 ??? abstract：objective the method for determination of ursolic acid in erlongzuoci pills by hplc-elsd was established. methods vp-ods c18 column was used with the mobile phase of methanol-0.5% acetic acid (90∶10). the flow rate was 0.8 ml/min. results ursolic acid showed a good linear relationship at the range of 63～630 μg/ml (r=0.999 9). the average recovery was 98.11% (rsd=1.14%). conclusions the method is simple, accurate and reproducible. it can be used for determination of ursolic acid in erlongzuoci pills.??? 　　key words：erlongzuoci pills；ursolic acid；hplc-elsd　　　　耳聋左慈丸原标准来源于2005年版《中华人民共和国药典》(一部),由磁石、熟地黄、山茱萸、牡丹皮、山药等组成,具有滋肾平肝的作用,用于肝肾阴虚、耳鸣耳聋、头晕目眩的治疗。原标准1中采用薄层扫描法测定山茱萸中熊果酸的含量,但薄层扫描法存在操作繁琐、受实验条件影响较大、重现性差等不足。我们建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法(hplc- elsd)测定制剂中熊果酸的含量,结果表明,该法简便易行,重现性好,回收率高,可用于耳聋左慈丸的质量控制。　　1? 仪器与试药 ??? 　　岛津lc-10at高效液相色谱仪,alltech2000型elsd检测器(美国奥泰科技有限公司)。流速：0.8 ml/min,漂移管温度：80 ,气体流速：2.2 ml/min,柱温：30 。??? 　　耳聋左慈丸为自制；熊果酸对照品购于中国药品生物制品检定所(批号110742-200415)。甲醇为色谱纯,水为重蒸水,其它试剂均为分析纯。　　2? 方法与结果　　2.1? 色谱条件2 ??? 色谱柱：vp-ods c18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：甲醇-0.5%醋酸(9010)；流速：0.8 ml/min；理论塔板数按熊果酸计算应不低于2 000。　　2.2? 对照品溶液的制备 ??? 精密称取在60 减压干燥4 h的熊果酸对照品适量,加甲醇分别制成1 ml含250 μg和350 μg的溶液,即得。　　2.3? 供试品溶液的制备 ??? 取本品15 g研细,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇100 ml,称定重量,超声处理40 min,放冷,称定重量,用甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取续滤液50 ml,置水浴上蒸干,加石油醚浸泡2次,每次2 min,倾去石油醚液,残渣加甲醇溶解,转移至10 ml量瓶中并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。　　2.4? 阴性溶液的制备 ??? 按处方比例称取除山茱萸外的其它药材,按耳聋左慈丸的制备工艺及供试品溶液的制备方法制备阴性溶液。　　2.5? 空白试验? ??? 取对照品溶液、供试品溶液及阴性溶液,依上述色谱条件测定,结果表明阴性无干扰(见图1)。　　2.6? 线性关系的考察 ??? 精密称取熊果酸对照品15.75 mg,置25 ml量瓶中,加甲醇超声溶解并稀释至刻度,精密吸取1、2、4、8、10 ml,置10 ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,分别吸取20 μl,照高效液相色谱法测定峰面积,以浓度对数(lgc)为横坐标,峰面积对数(lgs)为纵坐标进行回归处理,回归方程为：lgs=1.375 2 lgc＋3.209 6(r=0.999 9)。结果表明,熊果酸在63～630 μg/ml范围内具有良好的线性关系。　　2.7? 精密度试验 ??