医学论文：hplc法测定参桂调经丸中丹皮酚的含量.docVIP

【摘要】? 目的 建立hplc法测定参桂调经丸中丹皮酚的含量。方法 采用agilent hypersil-ods-c18分析柱(250 mm×4.0 mm,5 μm),以甲醇-水(7030)为流动相；检测波长为274 nm,流速为1.0 ml/min。结果 线性范围为0.052～0.84 μg(r＝0.999 9),平均回收率为99.94%(rsd＝1.63%)。结论 本法简便、灵敏、准确,可用于该制剂的质量控制。 【关键词】? 参桂调经丸；丹皮酚；高效液相色谱法 ??? abstract：objective to establish a method of hplc for determining the paeonol in shengui tiaojing pill. method agilent hypersil-ods-c18 (250 mm×4.0 mm, 5 μm) was used, the mobile phase consisted of methanol-h2o (70∶30). the flow rate was 1.0 ml/min. the detecting wave length was at 274 nm. results the method was linear at the range of 0.052～0.84 μg for paeonol (r=0.999 9). the average recovery was 99.94%. conclusion the method is simple, sensitive, accurate and can be applied to the quality control of paeonol in shengui tiaojing pill.??? 　　key words：shengui tiaojing pill；paeonol；hplc ??? 参桂调经丸是由党参(炙)、川芎(制)、牡丹皮等多味中药制成的中药制剂,具有温经活血之功效,临床用于月经不调、经前后虚冷腹痛、月经过多。本品标准收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第十四册1,原标准中无含量测定项。本品处方中牡丹皮具清热凉血、活血化瘀之功,为处方之主药,其主要成分为丹皮酚。笔者参考文献2建立了hplc测定其中丹皮酚含量的方法。通过方法学研究,证明本法准确、灵敏、重现性好、专属性强,可用于本品的质量控制。?　　1? 仪器与试药 ??? 安捷伦agilent1100高效液相色谱仪。丹皮酚对照品(批号110708-200506,由中国药品生物制品检定所提供)；参桂调经丸(佛山冯了性药业有限公司提供,批号0405002、0111027、0111903、0201001、0211006、0212007)。甲醇为色谱纯,其它试剂均为分析纯。　　2? 色谱条件??? 　　色谱柱：agilent hypersil-ods-c18(250 mm×4.0 mm, 5 μm)；以甲醇-水(7030)为流动相,流速为1.0 ml/min；温度：室温；检测波长：274 nm。理论塔板数按丹皮酚峰计算不少于3 500。　　3? 方法与结果　　3.1? 溶液的制备　　? 对照品溶液的制备 ?　　精密称取丹皮酚对照品适量,加甲醇制成每1 ml含15 μg的溶液。　　? 供试品溶液的制备? 　　取重量差异下的本品,剪碎,混匀,取1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精加70%甲醇50 ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250 w,33 khz)35 min,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足失重,摇匀,滤过,取续滤液,即得。　　? 阴性对照溶液的制备? 　　按处方比例及工艺, 制备不含牡丹皮的阴性对照样品,并按供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。按上述色谱条件,将上述3种溶液各进样10 μl,采集色谱图,阴性样品在丹皮酚峰位置无干扰峰。结果见图1。　　3.2? 线性关系考察 ??? 精密称取丹皮酚对照品约5 mg置50 ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,再分别精密吸取0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 ml置10 ml容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,各进样10 μl,照上述色谱条件测定峰面积。以进样量(μg)对峰面积积分值进行线性回归,得回归方程：y＝9 855.792＋2 066 694x,r＝0.999 9,线性范围为0.052～0.84 μg。　　3.3? 精密度试验 ??? 精密吸取同一对照品溶液l0 μl,按上述色谱条件重复进样6次,丹皮酚峰面积积分值rsd＝0.87%。　　3.4? 稳定性试验 ??? 取同一份供试品溶液(批号0405002),按上述色谱条件,分别每隔1