2012实验材料与试剂总结.docVIP

实验专题 常用方法技术与药品试剂 一、基本的实验方法和技术（补充） 1.植物叶片生成淀粉的鉴定技术 （1）适用于光合作用的有关实验 （2）主要步骤： 饥饿处理 光照 酒精脱色 加碘检验等 2.同位素示踪技术 （1）噬菌体侵染细菌实验 （2）光合作用中氧原子、碳原子转移的研究实验 （3）半保留复制实验 （4）分泌蛋白的形成过程 3.植物杂交技术 （1）雌雄同花：花蕾期去雄 + 套袋 + 开花期人工授粉 + 套袋 （2）雌雄异花：花蕾期雌花套袋 + 开花期人工授粉 + 套袋 4.育种技术 （1）杂交育种（2）人工诱变育种（3）单倍体育种（4）基因工程育种（5）细胞工程育种等。 二、实验中常用器材和药品的使用 1. 斐林试剂与班氏试剂：可溶性还原糖的鉴定 砖红色沉淀（水浴加热） 2. 双缩脲试剂：鉴定多肽（蛋白质）与双缩脲 紫色 3. 苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ：脂肪的鉴定（脂肪被苏丹Ⅲ染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染成红色，用显微镜观察；也可向待测样液中滴加） 4． 酒精：用于洗去浮色，配制解离液，叶片脱色，析出DNA（冷酒精），提取叶绿体中的色素，消毒处理，冲洗卡诺是固定液。 5. 碘液：鉴定淀粉（蓝色） 6． 吡罗红甲基绿 （混合染色剂、现配现用）：甲基绿使DNA呈现绿色（细胞核，面积小），吡罗红使RNA呈现红色（细胞质，面积大） 7. HCl：改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；使染色质中DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合；解离；改变溶液pH 8. NaCl：配制生理盐水（0.9%的氯化钠溶液，维持动物细胞的正常形态）及其他不同浓度的盐溶液，可用于测定动物细胞内液浓度；溶解(2mol/L)或析出DNA（0.14mol/L） 9. NaOH：用于吸收CO２或改变溶液的pH，模拟细胞大小与物质运输关系实验中应用 10. 健那绿染液 ：专一染线粒体的活细胞染料（健那绿溶解在生理盐水中制成健那绿染液，使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色） 11. 蔗糖：配制蔗糖溶液，用于测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原 12. 台盼蓝：台盼蓝使死细胞染成蓝色（正常的活细胞，细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝，区分活细胞和死细胞；检测细胞膜的完整性） 13. 20%的肝脏研磨液、 3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁溶液：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。 14. 可溶性淀粉、 3%的蔗糖溶液、 2%的新鲜淀粉酶溶液：探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验（应该用斐林试剂检测，不能用碘液进行检验，因为蔗糖及其水解产物与碘均不变色） 15. 3%可溶性淀粉、2%的新鲜淀粉酶溶液：探究温度对酶活性的影响（①先分别保温再混合， ②不能用斐林试剂检测，只能用碘液检测，③不能用H2O2做本实验） 16. 20%的肝脏研磨液、 3%的过氧化氢：探究Ph值对酶活性的影响（不能用淀粉酶催化淀粉探究探究Ph值对酶活性的影响） 17. Ca(OH)2（澄清的石灰水）：鉴定CO２（混浊程度不同可说明有氧呼吸与无氧呼吸产生二氧化碳的多少 18. 溴麝香草酚蓝水溶液：可检测CO2（由蓝变绿再变黄） 19．重铬酸钾溶液：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色（可以检测酵母菌的呼吸方式，也可检验酒驾） 20．乙醇或丙酮：用于提取叶绿体中的色素 21．层析液：可用于色素的分离，即将色素在滤纸上分离开。 22. 滤纸 ：过滤或纸层析 23. 二氧化硅：在色素的提取和分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分 24. 碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏 25. NaHCO3 ： 维持环境中CO２浓度的恒定 26. 改良苯酚品红染液、龙胆紫染液、醋酸洋红溶液（碱性染料）：用于染色体染色 27. 秋水仙素：阻断纺锤体的形成,使染色体加倍（人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗，可使染色体组加倍，原理是可抑制纺锤体的形成）（低温也可抑制纺锤体的形成） 28. 卡诺氏液：把经诱导处理的根尖放入卡诺氏液中浸泡0.5-1h，以固定细胞形态 29. 二苯胺：鉴定DNA（蓝色，沸水浴） 30. 柠檬酸钠：防止血液凝固，抗凝剂 31. 洗涤剂：提取植物细胞中DNA时瓦解细胞膜 32. 琼脂：激素的转移或配制固体培养基 33. PEG试剂：促融剂（灭活的病毒也可作为促融剂） 34. 氯化钙： 增大细菌细胞壁的通透性 35. 胰蛋白酶（胶原蛋白酶）：可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散开 36. 木瓜蛋白酶：嫩肉粉的主要成分，催化水解蛋白质 37. 蒸馏水：①在观察DNA、RNA分布中配染色剂；缓水流冲