过敏性哮喘患者调节性T细胞对Th17细胞和Th9细胞的影响.docVIP

  过敏性哮喘患者调节性 T 细胞对 Th17 细胞 和 Th9 细胞的影响# 刘晶，任锦，张庆华，闫冰迪，张捷，马忠森* 5 10 （吉林大学第二医院呼吸内科，长春 130041） 摘要：目的：深入研究过敏性哮喘病人（轻到中度）急性发作期的调节性 T 细胞对 Th17 和 Th9 细胞功能影响的异常。方法：招募 30 例过敏性哮喘病人（轻到中度）急性发作期和 30 例 健 康 者 ， 采 集 外 周 静 脉 血 30ml ， 分 离 PBMC ， 然 后 应 用 磁 珠 法 体 外 分 离 － 以上的标本继续下一步试验）。在 PHA 刺激下体外培养，检测效应 T 细胞增殖情况和 Th17 细胞，Th9 细胞特异性基因（RORC 和 PU.1）表达及特异性细胞因子（IL-17 和 IL-9）分泌 情况，检测哮喘病人 Th17 细胞和 Th9 细胞的异常情况；并给予 Tregs 干预，检测 Tregs 对 Th17 细胞和 Th9 细胞分化的影响。结果：哮喘组和健康对照组的 Tregs 均可以抑制 CD4+CD25 － 效应细胞增殖反应，但哮喘组 Tregs 的抑制功能较健康对照组明显下降（P=0.03）。哮喘 15 20 病人 RORC 表达和 IL-17 分泌均高于对照组（P＜0.05）， Tregs 对 RORC 表达的抑制能力 在哮喘组有所下降（P＜0.05），但对 IL-17 分泌的抑制能力在哮喘组和对照组没有显著差 别（P＞0.05）；哮喘病人 IL-9 分泌无论是否加入 Tregs 干预均高于对照组（P＜0.05），但 PU.1 表达只有在加入 Tregs 干预后才高于对照组（P=0.04）；Tregs 对 PU.1 表达和 IL-9 分 泌的抑制能力在哮喘组和对照组没有显著差别（P＞0.05）。结论：过敏性哮喘病人（轻到 中度）急性发作期 Tregs 数量和功能下降，而 Th17 细胞和 Th9 细胞的特异性基因表达和特 异性细胞因子生成增加，哮喘病人的 Tregs 在体外对 Th17 细胞的抑制功能有所下降，但尚 未发现 Tregs 对 Th9 细胞的抑制功能明显降低。 关键词：过敏性哮喘；调节性 T 细胞；TH17 细胞；TH9 细胞；急性发作期 中图分类号：R562.2+5 25 The abnormal suppressive capacity of regulatory T cells to Th17 and Th9 cells in asthmatic patients LIU Jing, REN Jin, ZHANG Qinghua, YAN Bingdi, ZHANG Jie, MA Zhongsen (Respiratory Medicine,the Second Hospital of Jilin University, ChangChun 130041) 30 35 40 45 Abstract: Objective: To study the abnormal suppressive capacity of regulatory T cells (Tregs) to effector cells,Th17 cells and Th9 cells in patients with mild to moderate asthma attack. Methods: Recruited asthmatic patients (n=30) and healthy control (n=30), collected peripheral venous blood from healthy control and asthmatic patients in mild to moderate attack stage respectively, and then － method (purity was above 90%). The effect cells were cultured with PHA stimulation with or without Tregs. Measured the proliferation (3H-Thymidine), expression of RORC and PU.1 (RT-PCR) genes, production of IL-17 and IL-9 (LUMNEX) in effect cells with or without Tregs intervention. Analyzed the abnormality of Th17 and Th9 cells and the supressive capacity of Tre