微小RNA-143 对人胰腺癌PANC-1 细胞迁移的抑制作用及其机制的探讨.pdfVIP

肿瘤2012 年11 月第32 卷第11 期　TUM OR Vol. 32, November 2012　　 855 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2012 .11.001 Copyright© 2012 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 微小RNA - 143对人胰腺癌PA NC- 1细胞迁移的抑制作用及其机制的 探讨 1 2 1 1 1 1 程文捷 ，唐　健 ，黄凤婷 ，庄燕妍 ，陈文博 ，张世能 1. 中山大学孙逸仙纪念医院消化内科，广东 广州　5 10 120 ；2 . 中山大学附属第六医院消化内科，广东 广州　 510655 [摘要]　目的：探讨微小RNA （microRNA ，miR ）-143 对人胰腺癌PANC-1 细胞生物学特性的影响。方法：人 工合成miR-143 的模拟物，并通过LipofectAMINE ™ 2000 转染入PANC-1 细胞。采用实时荧光定量PCR 法 检测miR-143 的表达水平。采用MTT 法和FCM 法检测对细胞增殖及凋亡的影响，采用Transwell 小室和划痕 β 实验检测对PANC-1 细胞迁移能力的影响。构建野生型及突变型转化生长因子 活化激酶1[transforming growth factor （TGF ）-β activated kinase 1，TAK1] 的3 ’端非编码区 （3 ’-untranslated region ，3 ’-UT R ）双荧光素酶报 告载体，检测海肾荧光素酶的相对活性以验证miR-143 对TAK1 mRNA 的作用靶点。结果：转染miR-143 模拟 物后，PANC-1 细胞中miR-143 表达上调，但其细胞增殖及凋亡与转染前的差异无统计学意义 （ P ＞0.05 ）。转 染miR-143 组通过Transwell 小室的细胞数明显低于各对照组，划痕实验检测结果显示细胞迁移能力受到抑制 （ P ＜0.05 ）。与各对照组相比，共转染野生型TAK1 的3 ’-UT R 和miR-143 可使海肾荧光素酶相对活性显著降低。 结论：miR-143 对人胰腺癌PANC-1 细胞的迁移能力有抑制作用，TAK 1 可能是其靶基因之一。 [关键词]　胰腺肿瘤；微RNAs ；细胞增殖；细胞凋亡；细胞迁移分析；丝裂原激活蛋白激酶类；转化生长因子β 活化激酶1 [中图分类号]　R735.9 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2012) 11-0855-07 Inhibitory effect of miR-143 on migration of pancreatic cancer PANC-1 cells in vitro and its mechanism 1 2 1 1 1 1 CHENG Wen-jie , TANG Jian , HUANG Feng-ting , ZHUANG Yan-yan , CHEN Wen-bo , ZHANG Shi-neng 1. Department of Gastroenterology, Sun Yat-sen Memorial Hospital, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510120, Guangd