原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白去除效果的研究.pdfVIP

第38卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究报告 第 1期 2010年 1月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 77～8l 原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白去除效果的研究 丁晓静 ， 杨媛嫒 李 芸 ， 赵 珊 王 志 (北京市疾病预防控制中心，北京 100013) (河北农业大学食品科学与技术学院，保定071001) (首都医科大学公共卫生与家庭医学学院，北京 100069) 摘 要 建立了毛细管电泳法分析 a一乳白蛋白 哥L球蛋 白A及卢哥L球蛋 白B的方法 ，考察了不同浓度冰乙 酸(HAc)及三氯乙酸(TCA)对原料奶、婴儿配方奶粉A和B及酸奶中蛋 白的去除效果。结果表明，TCA去除 蛋白效果优于HAc，不同样品所需TCA浓度不同：2g原料奶需3mL100g／LTCA；O．5g婴儿配方奶粉A和B 分别需5mL10 L及 2Og／LTCA；2g酸奶则需3mL20 LTCA才能将蛋白完全沉淀。为原料奶、婴儿配 方奶粉及酸奶等乳制品的样品前处理提供了有价值的参考。 关键词 乳制品；婴儿配方奶粉；酸奶；蛋 白质；毛细管电泳 1 引 言 色谱法分析原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶等乳制品中有益或有害化学成分时，必须除去其 中的蛋 白 以得到准确结果，因为蛋白很容易在色谱柱上产生不可逆吸附，导致柱效下降。牛奶蛋 白主要 由酪蛋白 和乳清蛋白组成，其中酪蛋白约 占总蛋白的80％，乳清蛋 白约 占15％。乳清蛋 白是酪蛋 白沉淀后上清 液中含有的蛋白 ，主要由Ot．乳白蛋 白(a—Lac)、哥L球蛋白(一Lg)、免疫球蛋白G (IgG)和牛血清白蛋 白(BSA)组成。其中d．Lac约 占乳清蛋 白的3％， ．Lg约占9％，IgG约占2％，BSA约 占1％，其它为非 蛋白氮 (NPN) 。而 一Lg又由 —LgA及 一LgB组成。 冰乙酸(HAc)及三氯乙酸(TCA)是常用蛋白沉淀剂 。文献报道的使用量一般为 1％ ，该用量能 否将上述3种样品中的蛋白去除干净，需分析蛋 白沉淀后的样品上清液中是否仍有蛋白残留。因此，有 必要建立能够准确测定乳清蛋白中含量较高的 ．Lac，卢一LgA及 一LgB的方法，以监测去除蛋 白前后 3种蛋白含量的变化 ，获知蛋 白的去除效果。 毛细管电泳(CE)法因其非常适合蛋 白分析而成为首选方法。常用的CE法一般利用涂层管或裸 管，通过往分离缓冲液中添加高分子聚合物 以实现蛋 白分离一 。有关 。Lac，—LgA及JB．LgB分离的 研究已见报道 ，但无定量数据。本研究建立了CE同时分离并测定O／一Lac， ．LgA及 』B．LgB的方法， 考察了HAc和 TCA对原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋 白的去除效果。 2 实验部分 2．1 仪器与试剂 BeckmanP／ACE5000型毛细管电泳仪 (美国Beckman公司)，配备紫外检测器；P／ACE工作站； F一33pH／mV型酸度计(北京屹源电子仪器科技公司)；Universal32型离心机 (德国Hettich公司)；Milli． poreMilli—Elix／RiOs型超纯水器(美国Millipore公司)；旋涡混合器(法国Gilson公司)。 硼酸 (优级纯 ，铁岭地区开源化工厂)；CsOH ·HO(99．5％，北京百灵威化学技术有限公司)；冰乙 酸 (99％)和NaOH(北京化学试剂公司)；羟丙基 ．环糊精 (HP ．cD，分子量 ：1540g／mo1)，聚氧化 乙 烯 (PEO，分子量 ：4000kg／oto1)，0c—Lac，／3-LgA及 ．LgS(Sigma．Aldrich公司)。原料奶采 自当地奶牛 场，婴儿配方奶粉及大果粒酸奶购于当地超市。 2g／LPEO储备液：称取0．2gPEO于 100mL试剂瓶中，加入 100mL水后于5Oc=【水浴中加热直 至溶解，摇匀后于室温放置备用。 —Lac，卢一LgX及 -LgB储备液：准确称取 10mgot-Lac，10mg ．LgA 2009-04-10收稿；2009-07-23接受 本文系jE京市卫生局青年基金 (No．QN2007．13)和北京市卫生局 “十百千”基金资助 十E-mail：dingxiaojin