低相对分子质量肝素联合紫杉醇对鼻咽癌细胞侵袭和迁移能力的影响.docVIP

2012;32(11)  南方医科大学学报（J South Med Univ）  ·1529·  基础研究 低相对分子质量肝素联合紫杉醇对鼻咽癌细胞侵袭和迁移能力 的影响 张 配，赵素容，宋乐乐，浦龙健，蒋志文，刘 浩，蒋琛琛 蚌埠医学院药学系//安徽省生化药物工程技术研究中心，安徽 蚌埠 233030 摘要：目的 探讨低相对分子质量肝素（LMWH）联合紫杉醇对鼻咽癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其相关的分子机制。方法 采用 MTT 法检测药物对鼻咽癌细胞 CNE1、CNE2 的增殖抑制效应；细胞划痕实验、Transwell 小室法检测细胞的迁移和侵袭能 力；Western blot 检测基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）的表达；ELISA 法检测细胞培养液 中乙酰肝素酶（HPA）的表达。结果 MTT 结果显示，不同浓度 LMWH 和紫杉醇对鼻咽癌细胞 CNE1、CNE2 均具有显著的增殖 抑制作用。200 U·ml-1 LMWH 与 0.1 μmol·L-1紫杉醇联合作用于 CNE1、CNE2 细胞 24 h 的迁移抑制率分别为 66.70%、70.53%， 较单用紫杉醇的迁移抑制率明显提高。同时 LMWH 与紫杉醇联合作用于 CNE1、CNE2 细胞的侵袭抑制作用也明显高于单用 紫杉醇的作用。LMWH 与紫杉醇均可下调 MMP-9 和 HPA 的表达，且合用时作用更加明显。结论 LMWH 具有增强紫杉醇抑 制鼻咽癌细胞侵袭和迁移的作用，其机制可能与下调 MMP-9 和 HPA 的表达有关。 关键词：鼻咽癌；低相对分子质量肝素；紫杉醇；侵袭；迁移；基质金属蛋白酶-9；基质金属蛋白酶组织抑制剂-1；乙酰肝素酶 中图分类号：R739.6 文献标志码：A 文章编号：1673-4254（2012）11-1529-07 doi: 10.3969/j.issn.1673-4254.2012.11.001 Effect of low-molecular-weight heparin combined with paclitaxel on the invasiveness and migration of nasopharyngeal carcinoma cells in vitro ZHANG Pei, ZHAO Surong, SONG Lele, PU Longjian, JIANG Zhiwen, LIU Hao, JIANG Chenchen Department of Pharmacy, Bengbu Medical College, Biochemical Drugs Engineering and Technological Research Center of Anhui Province, Bengbu 233030, China Abstract: Objective To investigate the effect of low-molecular-weight heparin (LMWH) combined with paclitaxel (PTX) on the invasiveness and migration of nasopharyngeal carcinoma cells and explore the molecular mechanisms. Methods MTT assay was used to detect the growth inhibition induced by LMWH and PTX in CNE1 and CNE2 cells. Wound healing assay and Transwell migration assay were employed to assess the effects of the drugs on the cell migration, and Transwell invasion assay was used to evaluate the cell invasiveness. The cellular expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 (TIMP-1) were analyzed by Western blotting. ELISA was used to determine the expression of heparanase (HPA) in the culture medium of the cells. Re