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基因工程(一)
DNA重组技术的基本工具基因工程的基本操作程序
时间:45分钟 满分:100分
一、选择题(每小题5分,共60分)
1.下列关于基因工程的叙述,正确的是( )
A.基因工程经常以抗生素抗性基因为目的基因
B.细菌质粒是基因工程常用的运载体
C.通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA,用另一种限制性内切酶处理运载体DNA
D.为育成抗除草剂的作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体
解析:本题考查了基因工程的操作工具。基因工程是按照人们的愿望,把一种生物的基因复制出来,加以修饰改造,然后导入另一种生物的细胞里定向地改造生物的遗传性状。在实际操作中一定用同一种限制性核酸内切酶来处理含目的基因的DNA和运载体DNA,使它们产生相同的黏性末端;不仅仅只有受精卵可以作为受体细胞,其他的体细胞也可充当受体细胞;目的基因是符合人们需要的基因,基因工程经常以抗生素的抗性基因为标记基因。
答案:B
2.在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是( )
A.限制酶和DNA连接酶 B.限制酶和水解酶
C.限制酶和运载体 D.DNA连接酶和运载体
解析:基因工程中的操作工具有3种,即“分子手术刀”、“分子缝合针”、“分子运输车”。在基因工程操作过程中,利用限制性核酸内切酶将DNA分子切开获取目的基因,同时用同一种限制性核酸内切酶将运载体切开,获得和目的基因相同的黏性末端;再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接起来。综合所给选项可知,A项正确。
答案:A
3.下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述,错误的是( )
A.一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B.限制性核酸内切酶的活性受温度的影响
C.限制性核酸内切酶能识别和切割RNA
D.限制性内切酶可从原核生物中提取
解析:本题考查基因工程的操作工具——限制性核酸内切酶的作用和来源。限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离纯化,是能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且在特定的切点将磷酸二酯键断开;酶的活性是受温度、酸碱度等的影响。
答案: C
4.降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰
期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如下图:
获得的双链DNA经EcoR(识别序列和切割位点)和BamH(识别序列和切割位点)双酶切后插入大肠杆菌质粒中,下列有关分析错误的是( )
A.Klenow酶是一种DNA聚合酶
B.合成的双链DNA有72个碱基对
C.EcoR和BamH双酶切的目的是保证目的基因和运载体的定向连接
D.筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因
解析:合成的单链DNA有72个碱基,从题图看出两条单链并未左右两端对齐配对,只通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,因此获得的双链DNA有碱基对72+72-18=126个碱基对。
答案:B
5.关于如下图DNA分子片段的说法正确的是( )
A.限制性核酸内切酶可作用于部位,解旋酶作用于部位
B.处的碱基缺失导致染色体结构的变异
C.把此DNA放在含15N的培养液中复制两代,子代中含15N的DNA占3/4
D.该DNA的特异性表现在碱基种类和(A+T)/(G+C)的比例上
解析:本题考查了基因工程的操作工具和遗传变异的知识。处的碱基缺失导致基因结构的改变属于基因突变;把此DNA放在含15N的培养液中复制两代,形成4个DNA分子,每个DNA分子都含有15N;DNA分子特定的碱基排列顺序决定了DNA分子的特异性。解旋酶在DNA分子复制过程中使扭在一起的两条脱氧核苷酸长链解开,暴露出相应的碱基。
答案:A
6.基因工程中,用“鸟枪法”获得的真核细胞的基因中因含有不能表达的DNA片段而不能直接用于基因的扩增与表达。因此在获取真核细胞的基因时,一般用人工合成基因的方法,下图便是一条重要的途径。下列叙述正确的是( )
已知的蛋白质的氨基酸序列
mRNA的碱基序列
DNA序列
人工合成基因
A.过程前后两种物质的种类是一一对应的
B.过程前后两种物质的种类是一一对应的
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