miR-181a 对人食管癌TE11 细胞增殖, 迁移和侵袭能力的影响.pdfVIP

1111 肿瘤2011 年7 月第31 卷第7 期　Tumor Vol.31, July 2011　　www . 613 DOI:10.3781/j.issn.1000-7431.2011.07.008 Copyright© 2011 by TUMOR Basic Research 基础研究 · miR-181a对人食管癌TE11细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响 1 2 3 1 3 李书军 ，牛秀兰 ，崔爱荣 ，和宇峥 ，吴文新 1. 河北医科大学第二医院胸外科，石家庄　050051 ；2. 河北涉县第二人民医院胸外科，邯郸　056400 ；3. 河北医 科大学第二医院病理科，石家庄　050051 [ 摘要 ]　目的：通过构建 miR-181a 的真核表达载体，研究其对人食管癌TE11 细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。 方法 : 以 95C 细胞基因组 DNA 为模板，扩增得到 miR-181a 前体序列，插入表达载体 pcDNA3.1 （+）克隆获得 pcDNA3.1 （+）-miR-181a 。将真核表达载体pcDNA3.1 （+）-miR-181a 转染到 TE11 细胞中，并采用实时荧光定量 - PCR （real-time fluorogentic quantitative-PCR ，RFQ-PCR ）对其表达情况进行验证。分别采用MTT 法、细胞划 痕法和 Boyden 小室法检测转染重组质粒 pcDNA3.1 （+）-miR-181a 对 TE11 细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力 的影响。结果：成功构建了插入 miR-181a 基因片段的真核表达载体 pcDNA3.1 （+）-miR-181a ；RFQ-PCR 检测 结果表明，转染 pcDNA3.1 （+）-miR-181a 的TE11 细胞能够过表达成熟的 miR-181a （P ＜ 0.05 ）。过表达miR- 181a 的TE11 细胞增殖能力、迁移能力和细胞侵袭能力均明显增强。结论：miR-181a 在 TE11 细胞中过表达能够 增加细胞的增殖、迁移和侵袭能力，为进一步深入研究 miR-181a 在肿瘤中的作用机制提供了实验依据。 [ 关键词 ]　食管肿瘤; 微小RNA 类; DNA，重组；TE11 细胞 [中图分类号]　R735.2 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431(2011)07-0613-06 The effects of miR-181a on proliferation, migration and invasion abilities of esophageal carcinoma cell line TE11 1 2 3 1 3 LI Shu-jun , NIU Xiu-lan , CUI Ai-rong , HE Yu-zheng , WU Wen-xin 1. Department of Thoracic Surgery, Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050051, China;