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实验二 神经干的动作电位 【实验目的】 了解蛙类坐骨神经干单相、双相动作电位的引导和记录方法，加深对兴奋的理解。 【实验原理】 动作电位是指细胞兴奋时，在静息电位的基础上发生的一次可扩播的电位变化过程，它是包 括神经细胞在内的所有有生命活动细胞兴奋时的客观标志。当神经干受到有效刺激时，通过局部 电流作用，会发生动作电位的传导。本实验采用细胞外记录方法，将两个引导电极置于正常完整 的神经干细胞膜外，当神经干一端兴奋时，兴奋波会沿着细胞膜传向另一端，先后通过两个电极 处，记录到两个方向相反的电位波形，称为双向动作电位。如果在两个电极之间损伤神经干，则 兴奋波只能由第一个电极引导出，只能记录到单个方向的动作电位。单个神经细胞的动作电位呈 “全或无”现象。而神经干是由许多神经纤维组成的，由于不同的神经细胞的兴奋性不相同，给 予神经干一个电刺激时，刺激强度的不同会引起一个到多个神经纤维的兴奋。当记录电极把多个 神经纤维的动作电位同时记录下来，所形成的动作电位图形称为复合动作电位。在一定范围内， 随着刺激强度的增大复合动作电位幅度会增大，它不具有单个神经细胞的“全或无”现象。 【实验对象】 两栖类动物蟾蜍或蛙。 【实验药品】 任氏液。 【实验器材】 粗剪刀、探针、蛙板、小木锤、大头针、手术剪、镊子、玻璃分针、瓷碗、培养皿、标本屏 蔽盒、带电极的接线若干、MedLab 生物信号采集处理系统。 【实验方法和步骤】 1．制备蟾蜍坐骨神经干标本 （1）毁脑和脊髓：按基础实验一介绍的方法，毁脑、毁脊髓。 （2 ）剪除躯干上部及内脏：用粗剪刀在骶髂关节水平以上 1.0～2.0cm 处横断脊柱。左手握住 蟾蜍脊柱，右手将粗剪刀沿脊柱两侧（避开坐骨神经）剪开腹壁，此时躯干上部及内脏全部下垂， 剪除全部躯干上部及内脏组织，弃于瓷碗内。 （3 ）剥皮：避开神经，用左手握住脊柱，右手捏住其上的边缘皮肤，逐步向下牵拉，剥离皮 肤至大腿时，如阻力较大，可先剥下一腿，再剥另一腿。皮肤剥除后，将标本置于盛有任氏液的 培养皿中。 （4 ）洗净双手和用过的全部手术器械。 （5 ）分离两腿：用粗剪刀沿着脊柱正中至耻骨联合中央剪开，分离两腿。 （6 ）制备坐骨神经干标本：将一条腿仰卧位放在蛙板上，在坐骨神经起始端的脊柱处，用丝 54 线紧靠脊柱根部结扎并剪断神经。用手轻提结扎神经的线头，用玻璃分针循股二头肌和半膜肌之 间的坐骨神经沟游离坐骨神经，纵向暴露分离坐骨神经直至腘窝胫腓神经分叉处，再将腓浅神经、 胫神经一直分离至足部。 辨清坐骨神经走向，然后置剪刀于神经与组织之间，顺神经走向剪至跟腱，在此处亦穿线结 扎，然后剪断神经，一条坐骨神经干标本制作完成了。 2 ．连接实验装置 按图 4-5 所示，将神经干平直置于标本屏蔽盒内的电极上，神经干与各电极接触良好。用导线 联接 MedLab 生物信号采集处理系统与标本盒。标本盒内衬以浸湿任氏液的滤纸，以增加盒内空 气湿度，防止神经干迅速干燥。 图4-5 神经干动作电位测定实验装置 3 ．仪器参数设置 点击“实验”菜单，选择“常用生理学实验”中的“神经干动作电位”项目。系统进入该实 验信号记录状态。仪器参数：2 、4 通道放大倍数 200 ，下限频率 8～80Hz、上限频率 10KHz，采 样间隔 25μs 。单刺激或主周期刺激方式，周期 1s，波宽 0.1ms ；刺激强度 0.1～3.0V 。记忆示波 方式，刺激器触发。 4 ．观察项目 （1）双向动作电位：将刺激幅度设置为 1V，点击“刺激”按钮，如标本兴奋性良好，实验装置 连接和仪器参数设置正确，屏幕上将出现动作电位。观察神经干双向动作电位的幅度在一定范围 内随刺激强度变化而变化的现象，见图4-6 。 （2 ）阈刺激：刺激强度由 0.1V 起，逐步增大，记录出现动作电位波形时的最小刺激强度值 55 （阈刺激）。 （3 ）最大刺激