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液中加入了无水乙醇。
提取率低
1） PE Buffer为碱性缓冲液，如果使用冰醋酸等酸性试剂固定的凝胶，会
造成提取时 PE Buffer 其 pH 值降低将影响提取得率。请在固定凝胶后
用清水或10mM Tris－HCl（pH7.0）溶液洗涤凝胶2～3遍。
2） 如果凝胶块碾磨不够充分，将造成提取率下降。请将凝胶块碾磨充分。
3） 在洗脱前，将洗脱液于30～60℃温浴，可提高提取效率。
吸光度测量结果问题
吸光度测量的是未知样品与调零标准之间的相对吸光度，所以请用与洗
脱液体相同的液体，对测量样品进行稀释和调零。
如何计算提取率
1) 由于回收前样品中，往往含有非目的 DNA 片段、引物、dNTP 等，所以
不能用测回收前后吸光度的的方法计算回收率。
2) 可将回收前后 DNA 片段一起电泳，使用凝胶成像系统拍照后，用配套 Biospin Polyacrylamide Gel DNA
的软件进行电泳条带灰度对比。
3) 注意，电泳条件及拍摄条件将对灰度对比结果造成很大影响，请仔细
操作，以减小误差。 Extraction Kit
附表：染色方法（供参考）
染色方法一： Biospin 聚丙烯酰胺凝胶 DNA 回收试剂盒
1． 用固定液（40 ％乙醇；10％冰醋酸）固定30 分钟。
2 ． 用致敏液（75ml 乙醇；17g 乙酸钠；0.5g 硫代硫酸钠；加水至 250ml ）致敏 30 分
钟。
3 ． 水洗 3 次，每次 10 分钟。
4 ． 银染 20 分钟。（0.625g AgNO3 加水至 250ml ，使用前加 100ul 的 37 ％甲醛）。
5 ． 水洗 2 次，每次 1 分钟。 Cat# BSC15S1
6 ． 显色（6.25gNa2CO3 加水至 250ml ，使用前加 50µl 甲醛）
7 ． 终止 10 分钟（3.65g EDTA Na H O 加水至 250ml ）
2 2 2
染色方法二：
1． 可在加样时将 DNA 样品与上样缓冲液以及 1µl 的0.5µg/ml EB 储存液混合后电泳。
2 ． 也可在电泳完成后，将凝胶置于含有 0.5µg/ml EB 的电泳缓冲液或水中浸泡 30～45
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