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MicroRNAs 在子痫前期患者外周循环和氧化应激血管内皮 细胞中的表达 研究生 甘露 导师 肖小敏 教授 专业：妇产科学 中文摘要 microRNA （miRNA ）是一类大小约 19-25 个碱基的非编码单链小分子 RNA ， 通过与靶基因mRNA 3 端非翻译区 （3 -UTR ）的碱基互补配对而发挥基因调控 [1] 用，在转录后水平调控基因的表达 。外周血循环 miRNAs 为诊断各种疾 病的生物标记物，如心血管疾病、肿瘤等已经成为目前研究的热点。miRNAs 在 血浆和血清中非常稳定，不易被血液中的 RNA 酶降解，在反复冻融和长期储 存的情况下仍能保持稳定。子痫前期 （preeclampsia, PE ）是产科常见的并发症， 该病的早期诊断与治疗一直是临床上的重点与难点。因此，探寻一种新的早期诊 断与治疗 PE 的有效指标和方法是临床医生的迫切需求。基 临床的需要和 miRNA 的特殊性质，临床是否可以应用 miRNA 为PE 的诊断标志物以达到 辅助诊断及评估病情的目的？因此，本研究旨在检测 miRNA 在PE 患者外周循 环 （血清及尿液）中表达量的变化，分析miRNA 与患者临床病理特征的相关性， 从而有助 对PE 的诊断、治疗及病情评估。目前，PE 的发病机制尚未完全明确， [2] 但是血管内皮细胞激活和损伤是PE 的中心环节已经得到大家的公认 。PE 的发 病一般分为两个阶段：第一阶段，胎盘的灌注减少；第二阶段，全身血管内皮的 [3,4] 激活和损伤，出现母体的多器官功能障碍 。研究显示连接这两个阶段最主要 [5,6] 的因素是氧化应激 。因此本实验通过建立氧化应激的血管内皮细胞模型，检 测相关 miRNAs 及其靶基因蛋白的变化，探讨 miRNAs 在氧化应激血管内皮细 胞中的 用；并通过采用miRNA 类似物 （miRNA agomir ）在血管内皮细胞中过 表达miR-125b-5p，观察内皮细胞在氧化应激状态下的活性和功能的变化，为氧 化应激血管内皮细胞的治疗寻找新的靶点和方向。 I 第一章 miRNAs 在PE 患者外周血血清及尿液中的表达 目的： 了解miRNAs 在PE 患者及正常妊娠者外周血血清、尿液中的表达，初步建立用 PE 诊断的标志物。 方法： 收集PE 患者 （n=20 ），其中重度PE 组 （n= 13）和轻度PE 组 （n=7 ）及正常妊 娠组 （n=20 ）的外周血血清及配对的尿液，采用基于茎环的实时荧光定量逆转录 聚 酶链反应 （real time reverse transcriptase PCR, qRT-PCR ）检测miR-155、 miR-125a-5p、miR-125b-5p、miR-210 的表达，并结 临床资料分析，应用SPSS13. 0 软件进行统计学分析。 结果： 1. 血清miR-210 在PE 组中的表达与正常妊娠组比较显著升高，差异有统计学 意义 （P=0.007 ），特别是重度 PE 组中表达显著升高 （P=0.02 ）；血清 miR-155 在PE 组中的表达与正常妊娠组比较显著升高，差异有统计学意义 （P=0.020 ）； 血清miR-125b-5p 在PE 组中的表达与正常妊娠组比较显著降低，差异有统计学 意义 （P=0.023 ）；PE 组血清miR-210 与尿液miR-210 的比值同正常妊娠组比较 显著升高，差异有统计学意义 （P=0.046 ）。PE 组血清miR-155 与尿液 miR-155 比值同正常妊娠组比较显著升高，差异有统计学意义 （P=0.01 ）。