运动对小鼠骨骼肌 VEGF、Flk-1、bFGFmRNA 表达及毛细血管密度的影响.pdfVIP

论文摘要 据研究推测，运动员有氧竞技能力的提高可能更有赖于骨骼肌能力的提高。 因此，骨骼肌的研究日益引起学者们的关注。骨骼肌在运动、缺血、缺氧条件下, 可能会产生组织学、血液动力学等一系列代偿性应急反应。组织代偿的主要方式 之一即毛细血管增生以增加供血、改善缺血缺氧；缩短氧从毛细血管向组织细胞 弥散的距离，增加组织供氧量。因此，毛细血管新生是骨骼肌在组织水平上适应 低氧、维持和提高机能的重要机制之一。 在运动条件下，骨骼肌毛细血管是否增生，目前还存在争议；长期运动对毛 细血管新生影响的研究也未深入展开，且已有的少量研究结论也很不一致。人们 尚未得到长期运动增加哺乳动物骨骼肌毛细血管密度的有力证据。若要探究长期 训练对骨骼肌毛细血管新生的影响规律，就有必要研究其内在机制。 影响毛细血管增生的因素中，VEGF 是近十年发现的一种能特异作用于血管 内皮细胞的促细胞分裂素和促血管生成因子，VEGF 与其特异性受体 Flk-1 结合， 发挥强大的促血管增殖能力，该过程由运动及低氧诱导。bFGF 能在血管内皮细 胞、平滑肌细胞、外膜成纤维细胞内合成，并能促进血管内皮细胞、平滑肌细胞 的增生及迁移，而且 bFGF 可以上调 VEGF 的产生。训练能否改变 VEGF、Flk-1、 bFGFmRNA 的表达?不同运动方式的效果是否相同？此方面研究还较少，有必要深 入探究。 本研究通过观察 3 月龄C57 小鼠在三种不同运动方式下，腓肠肌 VEGF、Flk-1 和 bFGFmRNA 表达及毛细血管密度的变化，探索长期的运动训练对毛细血管新生 的作用及有氧适应能力的影响，并试图寻找不同训练方式下微血管新生的变化规 律、分析可能的分子机制。 研究方法：本研究选取 32 只 10 月龄 C57 雄性小鼠为研究对象，随机分为 安静对照组(C)、耐力运动组(E)、爬梯运动组(R)、混合运动组(E+R)，每组各 8 只。对所选对象采用跑台和负重爬梯分别作为耐力训练与抗阻训练的运动模式。 7 月训练结束后 48 小时断颈处死，快速取小鼠后肢右侧腓肠肌，称重、编号， 放入 Eppendorf 管中，液氮速冻，转移至-80℃冰箱保存。应用 RT-PCR 检测方法 来测定 VEGF、Flk-1、bFGFmRNA 表达，运用冰冻切片和 AKP 染色的方法观察 毛细血管密度变化。 研究结果：经过 ７个月的训练后，小鼠的体重程上升趋势，其中安静对照组 体重变化最大，耐力运动组体重变化最小。三种运动都会引起腓肠肌质量/体重 的比值增加，骨骼肌净重比值上升。耐力训练后小鼠腓肠肌 VEGF、Flk-1、 bFGFmRNA 表达都没有变化。抗阻训练后，小鼠 VEGF、Flk-1、bFGFmRNA 表 达都明显增加，抗阻运动组 Flk-1、bFGFmRNA 的表达与安静对照组比较达显著 性差异 （P0.05) ， VEGFmRNA 的表达与安静组比较有极显著差异 （P0.01) 。 混合训练后小鼠腓肠肌 Flk-1mRNA 表达增加，与安静对照比较有显著性差异 （P0.05) ；bFGFmRNA 表达明显增加，与安静对照组比教有极显著性差异 （P0.01) ；而 VEGFmRNA 表达没有变化。通过显微镜观察，三种运动方式都 会导致骨骼肌毛细血管密度增加。 结论：运动能够提高肌肉的相对重量，促进内皮细胞增殖，毛细血管密度增 加。抗阻运动激活了 bFGF 、VEGF/VEGFR 信号通路，促进骨骼肌毛细血管密度 增加，是发展肌肉耐力的有效运动方式。混合运动激活了 bFGF 、FLK-1 信号传 导通路，促进了毛细血管密度的增加，也可以用来发展骨骼肌的代谢能力。耐力 训练对 bFGF 、VEGF/VEGFR 信号通路没有影响，而耐力运动后毛细血管密度增 加，说明耐力运动模式下还存在其它途径诱导毛细血管密度的增加。 关键词：骨骼肌；运动训练；毛细血管密度； VEGF；Flk-1；bFGF；基因表 达