耐力运动对C57_BL6J衰老小鼠骨骼肌中脂滴代谢的影响.pdfVIP

论 文 摘 要 研究目的 衰老过程中，骨骼肌质量与力量的下降 （Sarcopenia ）往往伴随着骨骼肌中 脂肪含量的增加。骨骼肌中脂肪含量的增加不仅仅能够引发胰岛素抵抗而且能够 干扰到骨骼肌的功能，但是骨骼肌中的脂肪累积所导致骨骼肌质量和力量下降的 机制目前还不是很清楚。已有研究表明，运动可以缓解衰老过程中脂肪在骨骼肌 的沉积，同时能够改善骨骼肌的功能。本研究通过选用自然衰老 C57/BL6J 小鼠 模型，探讨衰老 C57/BL6J 小鼠骨骼肌中脂滴相关蛋白、脂滴合成和分解代谢的 酶类、线粒体的变化对脂滴的影响以及在脂滴代谢过程的底物对骨骼肌中影响到 骨骼肌蛋白质合成 IGF/Akt/mTOR 细胞信号通路的影响，阐明脂肪在骨骼肌中的 变化情况以及对骨骼肌质量变化的影响。同时采取3 周跑台耐力训练这个外部因 素作用于骨骼肌系统 ，观察骨骼肌中脂肪的变化对骨骼肌蛋白质合成 IGF/Akt/mTOR 细胞信号通路的影响，了解脂肪累积效应对骨骼肌功能蛋白合成 的影响，从而阐明 Sarcopenia 与骨骼肌中脂肪累积关系的分子生物学机制。 研究方法 本研究采用 2 月龄和 24 月龄 C57/BL6J 雄性小鼠为实验对象，以自然衰老的 动物模型探讨 3 周的耐力运动训练对小鼠骨骼肌中脂滴代谢的影响，2 月龄的 C57/BL6J 小鼠随机分成青年安静组 （YC ）和青年耐力运动组 （YE ），每组各 8 只， 24 月龄的 C57/BL6J 小鼠随机分成老年安静组 （OC ）和老年耐力运动组 （OE ），每组各 7 只。利用 DEXA 的方法对小鼠的身体成分进行检测，并同时采 用实时荧光定量 PCR （Quantitative Real-time PCR ）和蛋白免疫印迹方法 （Western blotting ）对小鼠骨骼肌脂滴的相关蛋白 ADRP 和 OXPAT，脂滴相关水解酶 ATGL 和 HSL，脂滴相关合成酶 DGAT1 ，线粒体相关的 PGC-1α、Mfn 和 Drp1 ，调节 脂肪酸进入线粒体氧化关键酶 AMPK 和 ACC ，骨骼肌蛋白合成信号通路中的 IGF-1、Akt 和 mTOR 以及影响信号通路的PP2A 中的相关基因和蛋白进行检测。 研究结果 1）老年组小鼠体内脂肪质量升高，瘦体重有下降的趋势，3 周耐力运动没有改 善老年组和青年组小鼠身体成分。 2 ）衰老过程中，小鼠骨骼肌中脂滴相关蛋白对脂滴有双向调节作用；脂滴分解 和合成动态平衡趋向合成；线粒体生物发生降低，融合和分裂的动态平衡趋向分 裂导致功能障碍的线粒体增多；而衰老过程中骨骼肌中脂肪酸的氧化不依赖 AMPK/ACC2 的调节。 3 ）在衰老过程中，骨骼肌中蛋白质合成信号通路各功能蛋白的基因和蛋白表达 下调，导致骨骼肌中蛋白质合成降低；老年组小鼠骨骼肌中脂肪代谢的产物诱导 的磷酸酶PP2A mRNA 和蛋白表达的上调，是脂代谢干扰骨骼肌蛋白质合成信号 通路的执行分子。 4 ）3 周耐力运动导致 OXPAT 表达上调增加脂滴的氧化利用，ADRP mRNA 的表 达有运动时间的依赖性；对脂滴合成与降解动态平衡的影响是通过上调小鼠骨骼 中脂滴水解酶ATGL 和 HSL mRNA 表达趋向分解过程，降低脂滴在骨骼肌中的 沉积。 5 ）3 周的耐力运动能够诱导线粒体的生物发生，但对于线粒体融合和分裂的动 态平衡没有产生影响；同时对骨骼肌中脂肪酸进入线粒体进行氧化的调节蛋白没 有产生影响。 6 ）3 周的耐力没有影响到骨骼肌中蛋白合成信号通路，但是通过抑制骨骼肌中 PP2A 的表达，间接的保护了衰老过程中骨骼肌蛋白质合成。 结论 1）老年组小鼠身体成分的改变以体脂的增多为主要特征。 2 ）衰老过程中，脂滴的分解和合成代谢趋向合成，造成骨骼肌中脂肪的异位沉 积增加。 3 ）衰老过程中，脂代谢干扰骨骼肌中蛋白质合成的信号通路。 4 ）3 周的耐力运动使老年组和青年组小鼠骨骼中的脂滴合成和分解平衡趋向分 解，降低脂滴在骨骼肌中的累积 5 ）3 周的耐力运动能够诱导线粒体的生物发生。 6 ）3 周的耐力运动通过抑制脂代谢的底物缓解衰老过程中骨骼肌中蛋白质合成 的下降。 关键词： 脂滴；自然衰老小鼠；骨骼肌衰减；耐力运动；线粒体；蛋