利用罗非鱼制备低聚肽的研究.pdfVIP

摘 要 随着我国罗非鱼产量的逐年增加，开展罗非鱼的增值加工显得日益迫切。本研究以罗 非鱼肉的酶解物为原料，探讨利用树脂分离其酶解液中低聚肽的可行性，从而提高罗非鱼 的附加值，并降低低聚肽的生产成本，以便于其产业化，满足人们对保健低聚肽产品的需 求。主要结果如下： ⑴罗非鱼酶解工艺：底物浓度（煮熟鱼糜）5 ％，Alcalase 酶添加量为 2300u/g.鱼蛋白， 在 pH ＝8.0，55℃下反应 4h 后，灭酶，离心（过滤），得上清液。在此条件下，可获得平 均水解度为 17.86％的酶解液。 ⑵酶解液中游离氨基酸的脱除：采用阳离子交换树脂 732 分离酶解液中的游离氨基酸 及低聚肽，具体工艺为：料液 pH 为 3.0，室温下以流速 1mL/min 上柱；用 1mol/L NaOH 溶液洗脱，洗脱速度为 1mL/min。残余蛋白（多肽）、氨基酸含量、平均水解度及离子色谱 结果表明，阳离子交换树脂能有效吸附氨基酸，吸附率为 82.16 ％，但对残余蛋白（多肽） 吸附少，吸附率仅为 36.30 ％，且平均水解度无显著变化；1mol/L NaOH 溶液除能洗脱游 离氨基酸外，还能洗脱碱性氨基酸比例大的小分子低聚肽，洗脱率为 78.07 ％。 ⑶低聚肽的分离：静态交换实验表明，大孔树脂 AB-8 能有效吸附低聚肽。通过紫外 特征吸收、氨基氮含量、平均水解度、平均肽链长度变化、F 值及离子色谱，确定其最佳 柱层析工艺为：料液直接上柱，流速 1mL/min；采用 5 ％乙醇溶液洗脱，洗脱流速为 1mL/min； 在此条件下，可获得平均肽链长度分别为 1.18～6.43 的低聚肽。产物的紫外吸收图谱、离 子色谱图和氨基酸自动分析结果表明，产物氨基酸种类较多，表明获得的低聚肽为多种低 聚肽的混合物，需进一步分离纯化。 关键词：罗非鱼；酶解；低聚肽；强酸型阳离子交换树脂 732 ；大孔吸附树脂AB-8 ；分离 I Abstract China is the largest country for Tilapia production and the output increases annually, and its value-added processing becomes more and more necessary. In this paper, preparation of oligopeptides from Tilapia enzymatic hydrolysate using resins was investigated, the main results were as follows: ⑴Preparation of enzymatic hydrolysate from Tilapia. The optimal technology is mixed of 5% cooked Tilapia homogenate with 2300u/g fish protein and reacted at pH 8.0 and 55℃ for 4h, the undissolved solids in the slurries were removed by centrifugation. Under this enzymatic condition, the average degree of hydrolysis (DH) is 17.86%. ⑵Removal of free amino acids from the enzymatic hydrolysate. Amino acids were separated from the enzymatic hydrolysate using cation exchange resin 732. The adsorption condition of free amino acids by cation exchange chromatogr