薯蓣皂苷提取及其对缺血 再灌注损伤心脏的保护作用研究.pdfVIP

中 文 摘 要 甾体皂苷具有治疗心血管疾病作用。薯蓣是我国提取、生产甾体皂苷的主要药用植 物，对薯蓣皂苷尤其是双糖链大极性甾体皂苷的提取分离，及其防治心血管疾病的药理 作用研究有待深入探讨。本项目选取我国特有的、甾体皂苷含量高的盾叶薯蓣为原料， 对上述不足开展研究，主要内容有： 1 利用水煮法提取、乙酸乙酯和正丁醇萃取、反相层析技术从新鲜的盾叶薯蓣根茎中分 1 13 135 离得到一水溶性化合物（SY-C1），用 H －NMR、 C－NMR、 DEPT、HMQC 和HMBC 等方法鉴定其结构为双糖链5 糖甾体皂苷： (25R) -26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-呋甾烷-5-烯-3β, 22ξ-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→3) -β- D-吡喃葡萄糖基(1→4) -[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2) ]-β-D-吡喃葡萄糖苷。 2 以SY-C1 为样品，利用SD 大鼠乳鼠心肌细胞建立体外心肌缺血/再灌注模型，MTT 法测定各组心肌细胞存活率，自动生化分析仪检测各组培养液中LDH 含量。结果表明SY- C1 对大鼠乳鼠心肌细胞体外缺血/再灌注损伤无明显影响。 3 以SY-C1 为样品，应用Langendorff 离体心脏灌流装置建立大鼠离体心脏心肌缺血/再 灌注模型，观察各组左室舒张期末压（LVEDP）、左室发展压（LVDP）、左室内压上升的 最大速率（LV dp/dtmax）、左室内压下降的最大速率（LV dp/dtmin）、心肌单项动作电位（MAP） 及心率（HR）的变化。分别收集不同时间点的冠脉流出液，测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶 （LDH）含量。结果表明SY-C1 可使离体心脏缺血/再灌注后心功能明显提高，对大鼠离 体心脏缺血/再灌注损伤有明显的保护作用。 4 以SY-C1 为样品，以垂体后叶素和硝酸甘油模拟小鼠心脏缺血/再灌注损伤模型，观察 心输出量（CO）、每搏输出量（SV）、短轴缩短率（LVFS）、射血分数（LVEF）、E/A 峰（二 尖瓣E 峰与A 峰的比值）等指标。结果表明SY-C1 对垂体后叶素和硝酸甘油复制小鼠缺 血/再灌注损伤有保护作用，可改善小鼠心功能。 关键词 盾叶薯蓣；薯蓣皂苷；提取分离；缺血/再灌注；心功能；心肌细胞；离体心脏；超声心动 描记术 I Abstract Abstract AAbbssttrraacctt Steroidal saponins play a key role in the cardiovascular disease treatment. Dioscoreais the main herbs used for extracting the steroidal saponins in China. Both the methods for extracting the Dioscorea saponins, especially the bisdesmosidic saponins, and the pharmacological effects of Dioscorea saponins on the treatment of cardiovascular disease, are needed for further study. Thus, we selected Dioscoreazingiberensis, which is rich in steroidal saponin and only exists in China, for this study. The main contents are as follows: 1 The fresh rhizome of DioscoreazingiberensisC.H.Wrightwere extracted with boiling water and then was extracted with ethyl acetate and n-buta