新型芽孢杆菌益生菌的富营养化水体改良作用.pdfVIP

摘 要 水体污染问题，已经直接或潜在地威胁人类的生存和发展。利用微生物实施生物修复 成为研究与开发的热点，获得净水功能和制剂生产性能优良的优势菌株或其组合是创制高 效微生态净水产品的关键。芽孢杆菌是目前水产养殖中常用于调节水质的一类微生物。国 内外对其在净化污染水体应用的研究报道较少。本文对4 株芽孢杆菌的培养特性进行了研 究，对其产芽孢的发酵条件进行了优化，并对河涌水体进行实验室小试实验，为新型微生 物制剂的开发提供参考。实验结果表明： （1） 对4 株芽孢杆菌（枯草芽孢杆菌 BL1003 、地衣芽孢杆菌BS1103 、侧孢芽孢杆菌 BL2002 、多粘芽孢杆菌PP1004 ）分泌胞外蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶进行了平板培养和 液体发酵条件下酶活力研究，多粘芽孢杆菌 P. polymyxa PP1004 表现出最佳的酶活力，平 板培养条件下淀粉酶，纤维素酶，蛋白酶 H/C 值为 7.12、6.09、3.71，液体培养条件下淀 粉酶，纤维素酶，蛋白酶活力分别为 31.31MMU、1500U、320U； 采用交叉划线法综合分析 4 株芽孢杆菌对所选 7 种病原菌(大肠杆菌，肠球菌，李斯特 菌，小肠结肠耶尔森菌，假单胞菌，沙门氏菌，金黄色葡萄球菌) 的抑制作用，结果表明4 株芽孢杆菌对所用病原菌均表现出显著抑制作用，且对所选病原菌的抑制作用随着培养时 间的增加而呈现增强效果，抑菌效果PP1004 ＞BL2002 ＞BL1103 ＞BS1003 。 对4株芽孢杆菌在摇瓶阶段进行培养基和培养条件进行产芽孢优化发酵实验，并依据 优化结果对其进行30L罐发酵产芽孢实验，结果显示BS1003 、PP1004 、 BL2002 、BL1103 9 9 9 9 发酵可达到芽孢数1.95×10 、1.86×10 、2.39×10 、2.62×10 cfu/ml 。 （2 ） 在实验室条件下对污染程度严重的河涌水体投加4 株芽孢杆菌后，水质都有不同程 度的改善，水质改善效果以 BL1103 最好，CODcr、N-NH4 、T-P、浊度去除率可达到 80%、 94%、82%、81%；投加菌体组出现藻类死亡沉淀物，所投加的菌剂可能抑制了某些优势 藻类的生长。曝气对污染水体的净化效果更好。 对 BL1103 投菌量进行了单因素试验，合适的投菌量为 108cfu/L，菌剂投加量过多反 而抑制其对水体的净化作用；对芽孢杆菌采用不同配伍方式对对污染水体进行小试实验， 4 株菌共同使用净水效果最好，CODcr、N-NH 、T-P 去除率可达到 90 ％、92 ％、85 ％。 4 沙门氏菌、大肠杆菌、芽孢杆菌制剂不同配比加入试验水体中。芽孢杆菌在水体中 对于水体中沙门氏菌有抑制作用。但投加大肠杆菌 10 天后未检测到其在水体中的存在， I 因此不能判定芽孢杆菌对水体中大肠杆菌有抑制作用。同时用PCR-DGGE研究投加菌剂 后微生物群落多样性的变化，结果表明处理后微生物群落多样性变小。 本研究结果显示 4 株芽孢杆菌具有良好的产酶、抑菌性能，能够在实验室规模有效地 改善污染程度严重的河涌水水质，同时抑制水体中的水源性病源菌如沙门氏菌。证明该 4 株芽孢杆菌具有成为环境微生态制剂的潜在功能，还需要进一步的中试及深入研究。 关键词：芽孢杆菌；环境微生物制剂；培养特性；发酵优化；水体净化 II Abstract Water pollution has a direct or potential threat to human survival and development. Implementation of bioremediation by microorganisms is becoming an important method for water treatment. Key to get excellent microbiol ag