眼表给药载体的制备与改性研究.pdfVIP

摘要 鉴于眼睛特殊的生理构造，采用常规口服全身给药方式，药物不能及时作用 到眼球局部，难获得有效的治疗效果，而经由眼表直接给药是眼科临床中较为常 用的治疗方式。但是由于 （1）眨眼刺激和泪液冲刷作用缩短了药物在眼表的停 留时间；（2 ）药物经结膜腔、泪管旁路吸收的损失；（3 ）角膜致密结构阻碍药物 向内眼渗透，导致眼表给药体系普遍存在药物传递效率低、用药频次高，释放速 率不可控、毒副作用大等缺点。所以结合具体的剂型设计要求，制备高效药物载 体，提高药物的生物利用率是眼表给药体系的研究重点。目前适用的载体形式包 括了水凝胶、微胶囊、纳米粒子与纳米纤维等，在此基础上的应用剂型主要包括 了眼表黏附、眼睑粘膜植入和治疗性角膜接触镜（therapeutic contact lens ）三大 类。 本论文以加替沙星（GFLX ）为模型药物，具体选择了水凝胶与纳米微球两 种载体形式，进行载体制备与表征研究。在此基础上着重针对应用性更广泛的纳 米微球载体，先后利用分子印迹和表面改性进一步提升载体性能，改善生物相容 性、延长在眼表的停留时间。具体内容包括： （1）分别选用单体 （甲基丙烯酸缩水甘油酯 （GMA ）、甲基丙烯酸乙酯 （EMA ）、N －乙烯基吡咯烷酮（NVP ）、甲基丙烯酸二乙氨乙基酯（DEAEMA ）、 甲基丙烯酸（MAA ））与甲基丙烯酸－β －羟乙酯（HEMA ）进行本体共聚反应， 制备系列共聚改性PHEMA 水凝胶。表征产物的化学结构、溶胀率、力学强度等 性能，研究聚合条件和共聚单体对水凝胶基础理化性能和载药性能的影响。综合 比较结果，PHEMA-co-MAA 具有最接近商品化 PHEMA 软角膜接触镜 （commercial CLs ）的应用性能。载药量11.78±0.77 μg/mg，分别是PHEMA 和 commercial CLs 的4.4 倍和2.8 倍；在平稳释放的基础上，24 h 的累计释放量是 PHEMA 的 5.9 倍。生物相容性评价结果人角膜上皮细胞（SDHCEC ）在 PHEMA-co-MAA 水凝胶表面黏附生长、增殖情况良好。综上所述 PHEMA-co-MAA 是一类极具临床应用前景的治疗性角膜接触镜基材。 （2 ）使用热引发沉淀聚合法制备单分散的聚甲基丙烯酸纳米微球 （PMAA NPs ），分别采用扫描电子显微镜（SEM ）和动态光散射（DLS ）对产物微球的 显微形貌和粒径大小与分散性进行表征，并系统评价反应条件对载药量与体外释 I 放性能的影响，最后进行体外细胞培养实验评价其生物相容性。在 1 vol％单体 浓度，83 mol%交联剂配比条件下，成功制备出粒径 210.3±29.6 nm ，分散系数 （PDI ）1.06 的PMAA NPs 。产物微球的载药量和体外释放速率受交联剂配比影 响——50 mol %时，虽然具有最高的载药量，但是释放速率较快；70 mol%时， 载药量较高并且能实现缓慢释放。超薄切片TEM 观察结果，PMAA NPs 能通过 胞吞作用 （endocytosis ）进入SDHCEC 细胞，由于不具备生物可降解性，PMAA NPs 容易在胞浆内富集，导致部分细胞器结构发生病理改变。细胞存活率测试 （MTS ）表明PMAA NPs 具有一定的细胞毒性，毒性大小与使用浓度成正比。 （3 ）在成功制备单分散 PMAA NPs 的基础上，我们尝试应用分子印迹技术 （MIP ）继续优化载体性能。以GFLX 为模板分子，MAA 和二甲基丙烯酸乙二 醇酯（EGDMA ）分别为功能单体和交联剂，采用热引发沉淀聚合方法成功制备 出单分散的分子印迹聚甲基丙烯酸纳米微球（PMAA MIPNs ）。结合化学结构与 显微形貌表征、载药与体外释放实验，研究分子印迹对沉淀聚合反应的影响，及 其对载体性能的提升效果。结果表明GFLX 与MAA 间自组装形成的复合结构会 影响到聚合反应的成核和粒子生长过程，导致相同反应条件下 MIP 产物的粒径 小于非分子印迹（NIP ）产物。交联剂配比、功能单体与模板分子的比例是影响 分子印迹效果的主要因素——EGDMA 配比70 mol ％，GFLX/MAA 为1/5 时分 子印迹对载药量提升效果最明显，