MALDI—TOF—MS在奥曲肽结构分析中的应用.pdfVIP

维普资讯 药物分析杂志 ChinJPharmAnal2007，27(10) 一 1575一 MALDI—TOF—MS在奥曲肽结构分析中的应用 赵宗阁，肖丽华，刘建文，郝苏丽，杨化新 (中国药品生物制品检定所 ，北京 100050) 摘要 目的：应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI—TOF—MS)对奥曲肽进行结构确证分析。方法：采用二巯基 苏糖醇还原奥曲肽二硫键 ，碘代乙酰胺(IAM)封闭还原奥曲肽中的巯基，测定还原前后及烷基化奥曲肽相对分子质量 ，并应用 源后衰变(PSD)对其进行序列分析。结果：奥 曲肽、还原奥曲肽和烷基化奥曲肽相对分子质量测定值分别为 1019．25， 1021．24，1135．38，与PSD测定的序列相同，均和理论值一致。结论：本方法可以较快速分析奥曲肽结构，是此类多肽结构确证 的有效方法。 关键词：奥曲肽；基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 ；源后衰变；二硫键；多肽测序 中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：0254—1793(2007)10—1575—03 MALDI—ToF —M Sdeterminationofthestructureofoctreotide ZHA0Zong—ge，XIAOLi—hua，LIU Jian—wen，HAOSu—li，YANGHua—xin (NationalInstituteforthePharmaceuticalandBiologicalProducts，Beijing100050，China) Abstract Objective：Todeterminetheprimarystructureofoctreotidebymatrix—assistedlaserdesorptiort／ioniza— tiontime—of—flightmassspectrometry (MALDI—TOF—MS)．Method：Theoctreotidedisulfidebondwasreduced bydithioerythritol(DTY)，thereducedoctreotidewasalkylatedbyiodoacetamide(IAM)，hterelativemolecularmass ofoctreotide，reducedoctreotideandalkylatedoctreotideweremeasuredbyMALDI—TOF—MS，andtheaminoacid sequencewasdeZ／OYOinterpretedthroughpostsourcedecay(PSD)spectra．Results：Therelativemoleculramassof octreotideWas 1019．25，thereducedrelativeoctreotidemoleculra masswas1021．24，therelativemoleculra massof alkylatedoctreotidewas1135．38，allaccordedwiht thetheoretical values．ThePSD sequencingalsoaccordedwith thetheoreticalsequences．Conclusion：Themethod canquicklyandeffectivelyanalyzethe sturctureofoctreotide andsimilra peptides． Keywords：octreotide；MALDI—TOF—MS；postsourcedecay；disulfidebond；peptidesequencing 奥曲肽为人工合成的八肽生长抑素类似物，其 由苏氨酸的羰基还原为羟基所得。目前对奥曲肽进 作用与天然生长抑素相似，但作用较强且持久，半衰 行氨基酸组成分析时仅对前7个氨基酸定性或定 期延长。本品具有抑制生长激素、胰高血糖素和胰 量。在做常