基于ICCD的快速荧光显微成像技术及在活细胞研究中的初步应用.pdfVIP

基于ICCD的快速荧光显微成像技术及在活细胞研究中的初步应用.pdf

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第 2 6 卷 , 第5 期              光 谱 学 与 光 谱 分 析 Vol 26 ,No5 ,pp 9 1792 1 2 0 0 6 年 5 月              Sp ect ro scop y and Sp ect ral Analy si s May , 2006   基于 ICCD 的快速荧光显微成像技术及 在活细胞研究中的初步应用 林丹樱 , 孙云旭 , 马万云 , 韩  东 清华大学原子分子纳米科学教育部重点实验室 , 北京  100084 摘  要  利用像增强型 CCD 、氩离子激光器和氙灯等建立了一套快速荧光显微成像系统 , 并初步应用于活 细胞研究 。实时观测和拍摄了大鼠脑微血管内皮细胞增殖分裂过程中细胞内钙敏感荧光探针 Fluo3 标记的 钙离子浓度分布快速变化的图像 , 并选取动态图像中四个典型的点给出荧光强度灰度值的变化曲线 。该系 统可用于高灵敏实时记录活细胞内基于荧光显微成像的快速变化过程 , 为活细胞的研究提供了一种很好的 观察和分析手段 。 主题词  ICCD ; 快速荧光显微成像 ; 活细胞 ; 钙离子 中图分类号 : T H74   文献标识码 : A    文章编号 : (2006) 0509 1705 ( 我们利用像增强型电荷耦合器件 int en sified charge cou 引 言 ple device , ICCD) 作为检测系统 , 氩离子激光器及氙灯作为 激发系统 , 采用面激发方式 , 建立了一套快速荧光显微成像 (   活细胞与周围环境之间、细胞内生物大分子之间相互作 系统 , 并对大鼠脑微血管内皮细胞 rat cerebral microvessel s 用的实时、无损 、高灵敏 、时间和空间高分辨的观察与分析 , endot helial cell s , r CM ECs) 增殖分裂过程中钙离子浓度分布 是生物医学研究的重要分支[ 1] 。活细胞具有尺寸小 、变化 的快速变化过程进行了实时观测和成像 , 为该系统在生物医 快 、组分微量而复杂等特点 , 要保持细胞在 自然生理状态下 学上的应用展示了广阔的前景 。 检测有关的物理化学性质需要具有极高灵敏度和分辨能力的 手段 。荧光显微成像灵敏度高 、特异性好 , 是 目前常用的方 1  基于 ICCD 的快速荧光显微成像系统 法之一[24 ] 。荧光显微成像根据激发方式的不同可分为点激 发和面激发两种 。点激发方式即激发光仅激发样品中的微小   快速荧光显微成像系统由激发系统 、滤光系统 、检测系 ( 区域 , 通过扫描方式成像 , 如扫描近场光学显微术 scanning 统 、控制和数据处理系统组成 , 其框图如图 1 所示 。 nearfield op tical micro scop y ,

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