保加利亚乳杆菌茁-半乳糖苷酶基因克隆和序列分析.pdfVIP

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2017-09-13 发布于湖北
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保加利亚乳杆菌茁-半乳糖苷酶基因克隆和序列分析.pdf

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农业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2003,11 2 冤院 218~2 19 ·研究简报· - 保加利亚乳杆菌半乳糖苷酶因克隆和序列分析* 1 2 1 1 哲王春凤潘保良汪明 ** （1. 中国农业大学动物医学院，北京 100094 ；2. 吉林农业大学动物科技学院，长春 130118 ）关键词：保加利亚乳杆菌；半乳糖苷酶基因克隆；序列分析 - Cloning and Sequence of - galactosidase Gene of 1 2 1 1 Sun Zhe Wang Chunfeng Pan Baoliang Wang Ming ** (1.College of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing 100094, China; 2.College of Animal Science and Technology, Jilin Agricultural University, Changchun 1301 18, China) ; -galactosidase gene cloning; sequencing - 半乳糖苷酶 ( -galactosidase gene, - 在GenBank 中获得保加利亚乳杆菌 - 半乳糖苷 Gala)基因在机体的代谢中起重要作用，当乳糖作为酶基因序列，序列号为GI: 149546 。用primer 5 分子，，上游从唯一能源时 - 能水解乳糖成葡糖和半乳生物学软设计引物 27 耀48 bp ，加上 I 糖，而 - 缺陷型细菌不能利用乳糖，从而不能酶切位点及2 个保护性碱共30 bp ，即CG CTG [1] 存活，以此缺陷菌株作为受体菌，导入以 - CAG GGG CAA TTA ATG AAC TTG GAC A ；下游因为选择压力的载体，就会使此缺陷菌株得到弥从3 539 耀 3 560 bp ，加上 I 酶切位点及2 个保护即补生长。本研究以保加利亚乳杆菌的染色体D晕粤性碱共30 bp ， GC ATG CAT ATC GTT GCC 为模板，根据已知序列设计引物，扩增 - 基因 ATC TTC CTC ACT C ，由宝生物工程（大连）有限并对其进行测序，从而为构建以 - 基因为选公司合成。择标记的表达载体奠定础。 1.4 基因的孕悦砸扩增 1 材料和方法在同一PCR 管中加入模板 2.0滋 L ，10伊buffer 2.5滋 L ，d-NTP 1.5滋 L ，Primer 1 、