hsa-miR-125a-5p通过上调Rock-1表达促进肺癌细胞侵袭.pdfVIP

中国肺癌杂志2009年l0月第12卷第lo期 ChinJLungCancer，October2009，Vo1．12No．10 1069· · 基 础 研 究 · hsa—miR-12Sa一5p通过上调Rock-I表达 促进肺癌细胞侵袭 江黎黎 张清富 常继红 邱雪杉 王恩华 【摘要 l背景与目的 MicroRNAs(miRNAs)是广泛存在于真核生物体中的内源性非编码的小分子RNA，通过 与靶mRNA不完全互补连接的方式转录后凋控靶基因的表达 ，影响了牛物的许多复杂的生命过程。本研究探讨了hsa． miR-125a，5p促进肺癌细胞侵袭的作用机制。方法 应用microRNA．org靶基因预测资源预测hsa．miR-125a一5p的靶基因及其 结合位点，并进一步根据预测结果用RT-PCR和Westernblot的方法检测了Rock-1的mRNA及蛋 白的表达情况。用Rock-1 抗体阻断的方法 ，检测转染正义的hsa—miR一125a—Sp2-0，甲基寡核苷酸后A549细胞侵袭能力的变化 。结果 转染正义的 hsa—miR-12Sa．5p20 甲基寡核苷酸36h后 ，A549细胞中Rock-1mRNA和蛋白表达均增加 ，在转染反义 的hsa—miR-12Sa一5p 2-O．甲基寡核苷酸的A549~胞中则减少。Transwell／]＼室的结果显示 ，与未阻断组相 比较 ，阻断Rock-1后 ，转染正义的 hsa—miR-125a，5p2-O一甲基寡核苛酸的A549细胞侵袭能力减弱。结论 hsa—miR-125a—sp能够 }调Rock-1的表达 ，并促进肺 癌细胞侵袭。 【关键词 】microRNA；hsa—miR-125a，5p；目市肿瘤；侵袭 【中图分类号 】R734．2 DOI：10．3779／j．issn．1009—3419．2009．10．03 hsa．m iR．．125a．．5p EnhancesInvasioninNon．．sm allCellLungCarcinomaCellLines byUpregulatingRock一1 LiliJIANG，QingfuZHANG，HongjiCHANG，Xueshan03UJEnhuaWANG DepartmentofPathology,CollegeofBasicMedicalSciences,ChinaMedicalUniversity,Shenyang110001JChina CorrespondingaRthor：XueshanQUE—mail：qiuxues@hotmail．com 【Abstract】BackgroundandobjectiveMicroRNAs(miRNAs)areendogenous，non—codingsmallRNAineukary- otes．1=11eyrecognizetheirtargetsitesbyincompletebasepairingandpost七ranscriptionallyregulategeneexpressionJandfunction onalotofcomplexvitalprocessesoforganisms．Tl1eobjectiveofthisworkistostudyhowhsa—miR-125a5penhancestheinva。 siveabilityoflungcancercells．M ethodsThetargetgeneanditstargetsitesofhsa—miR-125a一5pwerepredictedbymicroR