常熟“沙家浜”绿茶多糖的纯化.pdfVIP

常熟 “沙家浜绿茶多糖的纯化 陈义勇 ，窦祥龙 ，黄友如 ，朱东兴 ，郁达 1(常熟理工学院生物与食品工程学院，江苏 常熟，215500) 2(常熟海虞茶叶有限公司，江苏 常熟，215500) 摘 要 以“沙家浜”粗绿茶为原料制取茶多糖，并对茶多糖进行脱蛋 白和脱色纯化研究。结果表明：聚酰胺吸 附柱层析法作为茶多糖纯化(脱蛋 白、脱色)的最佳方法，其脱色的适宜工艺条件为，聚酰胺用量为粗 多糖质量 的6倍 ，聚酰胺柱用 1．5倍柱体积 的去离子水 以 1．5mL／rain的流速进行洗脱 ，在此工艺条件下，蛋 白质脱除率 达到 95．8％。 关键词 茶 多糖 ，纯化 ，脱色 我国是茶叶生产大国，但是茶叶生产过程 中产生 752型紫外一可见分光光度计 ，上海精密科学仪器有 的粗老茶叶得不到充分利用 ，造成严重浪费 。茶 限公司；LD4-ZA型离心机 ，北京医用离心机厂 ；SHB． 多糖 (teapolysaccharides，TPS)是茶 叶中的一种重要 B循环水式真空泵 ，郑州长城科工贸公司；LGJ一10冷 生物活性物质 ，特别是在粗老茶叶中含量较高 ，研究 冻干燥仪，南京百思威科技有限公司；UV2102PCS紫 表明茶多糖具有增强免疫力 、降血脂 、降血糖 、抗辐 外扫描仪 ，上海精密仪器有 限公司。 射 、抗凝血 、抗血栓等功效，且原料很丰富，从粗老茶 1．3 试验方法 叶中提取茶多糖 ，可变废为宝，有效地减少这些粗老 1．3．1 茶叶预处理 茶叶的浪费，另一方面促进茶多糖在食 品、药 品及医 沙家浜粗绿茶粉碎 ，过 60目筛 ，用 95％乙醇在 疗保健等领域的应用，提高粗老茶叶的附加值，开发 70％条件下回流2次 ，每次3h，以有效去除部分醇溶 前景非常广阔 。 性物质 ，然后 2000r／min离心 30min，去除上清液， 目前在市场上销售的茶多糖纯度较低 ，含有较多 沉淀经60℃真空干燥，得到预处理茶叶粉。 的蛋白质、色素等杂质 ，因此对蛋白质 、色素等物质进 1．3．2 茶多糖含量测定 行去除是后续茶多糖制备中要解决的主要问题 。 改 良苯酚一硫酸法 。 本文以常熟沙家浜绿茶为原料 ，在前期对茶多糖 1．3．3 蛋 白质含 量测定 提取的基础上 ，对其进行了纯化研究 ，以期提高茶多 福林一酚法 。 糖纯度。 1．3．4 茶多糖 的提取 将预处理的茶叶粉末加入一定体积的水 中，设定 l 材料与方法 一 定的提取时间、提取温度、料液比和提取次数进行 1．1 材料与试剂 水浴浸提 。提取后冷却 ，然后将提取液离心(1000r／ 沙家浜粗绿茶 ，常熟海虞茶叶有 限公司提供 ；粉 ppm，15min)，合并上清液 ，将上清液减压浓缩，然后 末活性炭 ，成都科龙试剂公司；树脂 s一8，天津南开大 向浓缩上清液中加入浓度为 95％的工业乙醇，调至 学化工厂；聚酰胺 ，中国医药集团上海化学试剂公司； 含醇量为80％，静置 12h后离心 ，沉淀用无水 乙醇洗 葡萄糖 、苯酚 、三氯 甲烷、正丁醇 、三氯 乙酸、葡萄糖 、 涤 3次 ，然后冷冻干燥 即得茶多糖 。 苯酚、浓硫酸、体积分数 95％乙醇等 ，均为分析纯。 1．3．5 茶 多糖脱蛋 白方法 1．2 主要实验仪器 1．3．5．1 Sevage法 RE一52A型旋转蒸发仪 ，上海亚荣生化仪器公 根据蛋 白质在三氯 甲烷等有机溶液中变性的特 司 ：DJ．