RNA干扰抑制视网膜母细胞瘤细胞血管内皮生长因子的表达.pdfVIP

第47 卷 第7 期 山 东 大 学 学 报 医 学 版 2009 年7 月 Vol.47 No.7 JOURNALOFSHANDONGUNIVERSITYHEALTHSCIENCES Jul. 2009 文章编号:167107-0013-03 RNA 干 扰 抑 制 视 网 膜 母 细 胞 瘤 细 胞 血 管 内 皮 生 长 因 子 的 表 达 1 1 1 3 1 2 刘德荣 ,蔡可丽 , 卓建 ,吴晓莉 ,杨雪莉 ,杨博 1. 山东 大学 齐鲁 医院 眼科, 济南250012;2. 山东大学齐鲁医院麻醉科, 济南250012; 3. 山东省荣军总医院眼科, 济南250013 摘要:目的 利用RNA 干扰 RNAi 技术,研究血 管内皮 生长因子 VEGF 编码 基因的siRNA 对 人视网 膜母细胞 瘤 RB 细胞的影响,从而探讨通过抑制血管内皮生长因子在视网 膜母细胞 瘤组织 中的表达 来治疗 视网膜 母细胞瘤 的机理 。 方 法 将VEGF 编码基因特异的siRNA 转染入视网 膜母细胞瘤细胞,采用RT2PCR 和Western2blot 技术 检 测siRNA 处理前后RB 细胞VEGF 基因表达变化 。MTT 法检测siRNA 处理前后RB 细胞生 长的抑制 情况 。结果 RT2PCR 和Western2blot 均显示VEGF 特异性siRNA 对视网膜母细胞瘤细胞血管内皮生长因子基因的 表达有抑制 作 用,MTT法检测RB 细胞生长的抑制情况显示,抑制率可达40%。结论 VEGF 特异性siRNA 的 特异性基因 沉默作 用对RB 细胞VEGF 基因的表达有抑制作用 。 关键词:RNA 干扰;视网膜母细胞瘤;血管内皮生长因子 中图分类号:R739.7 文献标志码:A RNAinterferenceinhibitsVEGFexpressioninretinoblastoma cells:anexperimentalstudy 1 1 1 3 1 2 LIUDe2rong ,CAIKe2li ,ZHUOJian ,WUXiao2li ,YANGXue2li ,YANGBo 1.DepartmentofOphthalmology,QiluHospitalof ShandongUniversity,Jinan250012,China; 2.DepartmentofAnesthesiology,QiluHospitalof ShandongUniversity,Jinan250012,China; 3.DepartmentofOphthalmology,ShandongRongjunHospital,Jinan250013,China Abstract:Objective ToexplorethepossibilityofVEGFasatherapeutictargetforretinoblastoma,weemployedRNAinterfer2 encetoinhibitVEGFexpressioninretinoblastomacells. Methods SiRNAoligoofVEGFwassynthesizedandtransfectedinto retinoblastoma cells. VEGFmRNAexpressionandproteincontentwererespectivelydetermined byreversetranscriptionpoly2 merasechain reaction RT2PCR andWestern blot. Retinoblastoma cell proliferationwas detectedbyMTTreductionassay. Results VEGFmRNAexpressionandproteincontentweresignificantlydecreasedbyVEGF2targetedsiRNA.MTTreductionas2 sayshowedthattheinhibitionratiowas40%. Conclusion VEGF2targetedsiRNAcaneffectivelyinhibitexpressionofVEGFin retinoblastomacells. Keywords:RNAinterference;Retinoblastoma;Vascularendothelialgrowthfactor 视网膜母细胞瘤retinoblastoma,RB 是婴幼儿 敷贴器