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中国公共卫生2009年11月第25卷第 11期 ChinJPublicHealthNov2009VoL25No.11 1359
文章编号:1001-0580(2009)11-1359-02 中图分类号:Q24 文献标志码 :A 【实验研究】
3一氯 一1,2一丙二醇对人胚肾293细胞 DNA损伤作用
曲花玲 ,姜丽平 ,于畅。,耿成燕 ,仲来福 ,陈敏 ,刘晓芳
摘 要:目的 研究3一氯 一1,2一丙二醇(3一MCPD)对人胚肾293(HEK293)细胞DNA损伤作用。方法 以
HEK293细胞为靶细胞,3一MCPD设5个剂量组 :0,1.25,2.5,5,10mmoVL,应用单细胞凝胶 电泳检测3一MCPD诱
导的HEK293细胞 DNA损伤;将3一MCPD设4个剂量组:0,2.5,5,10mmol/L,以2,7一二氢二氯荧光素(DCFH)法
测定HEK293细胞内活性氧 (ROS)水平;将 3一MCPD设4个剂量组:0,1.25,2.5,5mmol/L,通过免疫组化法测定 8
一 羟基脱氧鸟苷 (8一OHdG)在 HEK293细胞内的表达水平。结果 与对照组比较 ,1.25—10mmol/L的染毒组细胞
DNA链断裂 ,细胞形成彗星样脱尾,尾DNA%明显上升,且呈剂量依赖关系(P0.05)。2.5~10mmol/L的染毒组
细胞内ROS水平表达升高 ,在 10mmol/L时明显升高 (P0.05)。1.25~5mmol/L的染毒组细胞内8一OHdG表达
水平上升,在 2.5和5mmoVL时8一OHdG表达明显增强 (P0.05)。结论 3一MCPD导致了HEK293细胞 DNA
损伤,可能是通过细胞内ROS升高及8一OHdG形成增加所造成的氧化性DNA损伤作用。
关键词:3一氯 一1,2一丙二醇;HEK293细胞 ;DNA损伤;氧化应激
3-monochloropropane-1,2-diolindue~ oxidativeDNAdamagein耽 K293cells QUHua-ling,JIANGLi—ping,YU
Chang,eta1.Departmentof D NutritionandSafty,DalianMedicalUniversity(Dalian116044,China)
Abstract:Objective TheDNAdamageinducedby3-monochloropropane一1,2-diol(3-MCPD)andtheunderlynig
mechanismswerestudide inHEK293cells.M ethods AstargetceHs.HEK293cellsweretreatedattheconcentrationsof0,
1.25.2.5,5.and10mM witll3.MCPDat37℃ for1hr.Thesinglecellgelelectrophoresisassay(sCGE)wasappfiedofr
quantitativeanalysisofDNA damagewhichwascausedbv3.MCPD.W ealsomeasuredhtelevelofintracellularROSbyuse
ofthe2.7.dichlomfluoresceindiacetate(DCFH—DA)assaywhenHE 93cellsweFertea~dwitIldifferentconcentrationsof
3一MCPD (0.2.5,5.and10mM)at37℃ ofr1tlr.ThelevelofoxidativeDNAdamagewasevaluatedusnigimmunoperoxi-
dasestainingofr8-hydroxydeoxygunaosinef8—0HdG)whenHEK293cellsweretreatde wiht differentconcen~afionsof3-
MCPD (0,1.25.2.5.5mM )at37oC ofr3hr.Results Theresultsshowde that3一MCPD atalltestedconcentrations
(1.25—10m
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