VEGF-ASODN转染对舌癌Tca8113细胞VEGF表达及生长的抑制作用.pdf

上海 口腔 医学 2009年 10月 第 18卷 第 5期 ShanghaiJouma1ofStomatologyVo1．18No．5October，2009 ·509· [文章编号]1006．7248(2009)05—0509．06 VEGF—ASODN转染 对舌癌Tca8113细胞 VEGF表达及生长的抑制作用 李晓光 ，王延秀 ，周宝琴 ，亓春花 。 (1．山东省泰安市中心医院 口腔科 ，2．麻醉科 ，3．中心实验室 ，山东 泰安 271000) [摘要】目的：研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)一反义寡核苷酸(ASODN)转染舌癌Tca8l13细胞对其VEGF表达和 生长 的抑制作用 。方法：人工合成硫代磷酸化 VEGF—ASODN，转染舌癌Tca8l13细胞 ，24h后 ，应用原位杂交及免疫细 胞化学法检测细胞 VEGFmRNA及蛋 白表达 ，ELISA法检测培养液上清中VEGF蛋 白含量 ，流式细胞仪检测细胞凋 亡情况 ，用MTY实验检测转染对细胞活性 的影 响，用细胞生长 曲线表示转染对细胞生长的影响 。结果与对照组 比较 ． 采用 SPSS12．0软件包进行统计学分析 。结果：VEGF—ASODN能显著降低 VEGFmRNA及蛋 白水平 ，降低培养液 中 VEGF蛋白含量 ，增加细胞凋亡 ，抑制细胞活性及生长(PO．05)。结论 ：VEGF—ASODN转染舌鳞癌 Tea8113细胞 ，能显 著抑制 VEGFmRNA及蛋 白表达 ，增加细胞凋亡 ，抑制细胞生长 。 [关键词】血管内皮细胞生长因子 ；反义寡核苷酸；转染 ；Tea8113细胞 【中图分类号】R739．8 [文献标识码】A TheeffectofVEGF—AS0DN transfectiononexpressionofVEGF andgrowthintonguesquamouscancercellline Tcaall3 LIXiao—guang，WANGYan—xiu2,ZHOUBao-qin3,QIChun-hua3．．DepartmentofStomatology，2．Department 0厂Anesthesiology,3．CentralLaboratory，TaianCity Central Hospita1．Tai’an271000,ShandongProvince，China) [Abstract] PURPoSE： To evaluate theeffectoftransfection ofvascularendothelialgrowth factorant／sense oligonucleotide(VEGF—ASODN)onexpressionofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)andgrowthintonguecancer cells．METHODS：The VEGF—ASODN was synthesized with phosphorothioic acid．After transfecting withVEGF— ASODN intonguecancercellsTca8113． thequantityofVEGFmRNA andproteinwasdetectedbyhybridization nsitu andimmunocytoehemistry andthequantityofVEGFproteininsupernatantwasdetectedbyELISA． FCM andMTF methodswereusedtodetectcellularapoptosisandtheactivityofcells， respectively． Theeffectoftransfectiononthe growthofcellswasevaluatedbygrowthcurve．SPSS12．0softwarepackagewasusedforstatisticalanalysis．RESULTS：