降解PVA混合菌系的筛选及菌株的分离纯化.pdfVIP

西 安 工 程 大 学 学 报 JournalofXi’anPolytechnicUniversity 第24卷第4期(总 104期) 2010年8月 Vo1．24，No．4(Sum．No．104) 文章编号：1674．1549x(201O)O4一D448 降解 PVA混合茵系的筛选及菌株的分离纯化 郭雅妮 ，赵倩楠 ，崔双科 ，同 帜 ，李海红 (1．西安工程大学 环境与化学工程学院，陕西 西安710048；2．陕西省现代建筑设计研究院，陕西 西安710048) 摘要：从4个样品中筛选出一能够高效降解聚乙烯醇(PVA)的混合茵系，并对其驯化培养及分离 纯化，得到了7株菌株，均能够降解聚乙烯醇．通过菌落形态和生理生化实验对这些茵株进行了 初步鉴定．同时考察了混合菌系与单菌株降解效果的比较．结果说明混合菌系的降解效率远远大 于单菌株，48h降解率可达90％以上． 关键词：聚乙烯醇；混合菌；筛选；鉴定 中图分类号 ：X172 文献标识码：A 聚乙烯醇(PVA)是纺织工业中棉织物的理想上浆剂，经退浆车间洗脱排除，会产生大量富含可溶性 PVA的退浆废水，引起受纳水体污染．但 由于 PVA的可生化性较差 ，这些废水难 以用常规方法进行处 理 j．近年来，研究者们发现 的能够降解PVA的微生物有些可以单独降解 PVA，也有一些通过共生，互 相补给降解PVA，但要靠单一微生物实现对PVA的彻底降解是非常困难的，只有通过驯化混合菌群才能 达到对这种高聚物的彻底降解． 本文从陕西国棉三厂、陕西华润服装印染有限公司和兴庆公园收集到4种不同样品，对不同采样点的 样品进行筛选，筛选出了一个能完全降解PVA的混合菌系，并与前期筛选出的PVA优势降解单菌株进行 效果 比较． 1 实 验 1．1 试剂 PVA，化学纯，天津科密欧化学试剂有限公司，醇解度为99．8％～100％．其他试剂为均分析纯． 分离筛选培养基组成：PVAlg／L，NH4NO31g／L，酵母膏 0．1g／L，K2HPO41．6g／L，KH2PO40．2g／L， MgSO4·7H2O0．05g／L，CaC120．05g／L，FeSO4·7H2O0．02g／L，NaC10．02g／L，加水配制成 1000mL；pH =7．2． 固体培养基组成：在分离筛选培养中加入 1．5％一2％的琼脂． 1．2 仪器 YX280B型高压蒸汽灭菌锅 (上海三申医疗器械有限公司)、CKX41型荧光倒置显微镜 (奥林帕斯有 限公司)、DKZ-2型电热恒温振荡槽 (上海精宏科学仪器有限公司)、SPX-250B型恒温培养箱 (上海一恒科 收稿 日期：2010-05-26 基金项目：陕西省教育厅专项科研计划项 目(09JK448)；陕西省科技厅科学技术研究发展计划项 目(2010K02—10) 通讯作者：郭雅妮 (1972一)，女，陕西省洛南县人 ，西安工程大学副教授．E—mail：guoyani2002@yahoo．corn．cn 第4期 降解PVA混合菌系的筛选及菌株的分离纯化 449 技有限公司)、TDL-4．A型离心机(上海安亭科学仪器厂)、V．1100可见分光光度计 (上海美谱达仪器有限 公司)． 1．3 实验方法 1．3．1 菌种来源 样品分别取 自陕西国棉三厂的浆纱机周围废料 (凝胶状，1号样)、浆纱机底部水槽处 (黑色块状，2号样)和陕西华润服装印染有限公司退浆废料(3号样)，以及兴庆公园土样(4号样)． 1．3．2 降解PVA混合茵系的分离 将采集的4份样品各取 1g置于0．1mol／L的NaCl溶液中，混匀，再 取 lOmL置于装有 100mL筛选培养基的250mL三角瓶中，于3Oo(=、200r／min下振荡培养3d后，由摇瓶 中吸取2mL混合培养物移人装有 100mL筛选培养基的250mL三角瓶中，重复几次后，检测、比较不同培 养体系中PVA含量的变化，选择其中PVA含量下降最多的混合培养物继续培养． 1．3．3 降解PVA单茵落的分离 将上述培养液稀释为 10～，l0～，10～，1O～，10～，1O一，10～，10～， l0一，l0 。浓度