河南省4种地方品系鸡的RAPD分析.pdfVIP

中国畜牧兽 医 2010年第 37卷第 8期 生物技术 ·27 · 河南省 4种地方 品系鸡 的 RAPD分析 王善强 ，柴保 国。，周鑫 ，李春丽 ，赵卫东 ，郑振宇 (1．河南农业大学牧 医工程学院，郑州 450002；2．河南农业大学生命科学学院，郑州 450002) 摘要 ：应用随机扩增 多态性 DNA(randomamplifiedpolymorphicDNA，RAPD)技术分析河南省 4个地方鸡 的品系 ，固始 鸡快羽G 系、固始鸡慢羽G 系、矮小型绿壳蛋鸡 、黄麻羽丝毛乌骨鸡 的遗传变异 。用 186个随J0t~JI物对 4个鸡种基 因组 DNA 池扩增筛选 ，4O个 引物产生多态性 。此4O个引物经重新优化反应体系后 ，对 120个个体的基 因组 DNA进行 RAPD分析 。4O 个引物共产生 387种扩增片段 ，扩增产物片段的长度大小在 100~2220bp范围内。利用 电泳分析数据分别计算 4个 品系群 体之间的遗传相似系数和遗传距离指数 ，结果 4个鸡种的亲缘关系与它们 的引种情况基本一致 。同时也证 明了RAPD技术 可以作为分子标记 ，很好地检测鸡种群 内的遗传变异及区分不 同鸡品系 。 关键词 ：遗传距离 ；RAPD；鸡 中图分类号 ：$83l_8 文献标识码 ：A 文章编号 ：1671—7236(2010)080027—03 随机扩增多态性 DNA(random amplifiedpoly— 平上对上述 4个鸡品系进行 了亲缘关系分析 ，为利 morphicDNA，RAPD)技术是美 国杜邦公司的科学 用 RAPD标记预测杂种优势的可能性奠定 了基础 ， 家 Williams等 (1990)和 加 里 福 尼 亚 生 物研 究所 也为进一步育种和保种工作提供 了分子生物学方面 Welsh等 (1990)2个研究小组发展起来的一项研究 的参考依据。 遗传物质本身的分子生物学技术 ，该技术具有操作 1 材料与方法 简单快捷 、检测能覆盖整个基 因组 DNA、样 品用量 1．1 材料 试验用 固始鸡快羽G 系、固始鸡慢羽 少 、灵敏度高等特点 ，因而，此技术 自建立 以来 已广 GM系、矮小型绿壳蛋鸡 、黄麻羽丝毛乌骨鸡血样均 泛应用于群体遗传关系分析、遗传多样性评价、亲缘 采 自河南农业大学科研种鸡场。每个 品系各 30只 ， 关系鉴定 、种属分类、物种的起源与分化 、基因定位 、 翅静脉下抽取约 2mL血样 ，肝素钠抗凝 ，于一7O℃ 连锁 图谱 的构 建 等领域 (Halward等，1992；Singh 冰箱保存 。 等 ，2003；王荣平等 ，2003)。RAPD标记在鸡遗传育 1．2 试剂和仪器 随机 引物、TaqDNA聚合酶 (5 种研究上的应用 ，已有一些报道 (任军等 ，2001；王光 U／I)、10×PCR 缓 冲液 、MgC12(25mmol／L)、 瑛等 ，2003)。河南省地处 中原 ，气候 、地理及地形复 dNTPs(各 10mmol／L)、6×电泳 上样缓 冲液、 杂多样 ，经过长期驯养和选育 ，形成了多个地方家禽 Marker(D2000)(大连宝生物公司)；生化试剂 (郑州 品系。本试验在河南农业大学科研种鸡场培育成的 隆鑫化玻设备 公司)。梯度 PCR仪 (Eppendorf)； 禽类地方品系中，选取 固始鸡 快羽Gx系、固始鸡慢 DYY一6C电泳仪 、DYCP一31D水平式 电泳槽 (北京市 羽GM系、矮小型绿壳蛋鸡 、黄麻羽丝毛乌骨鸡 ，以其 六一仪器厂)；UVP凝胶成像系统 (美国基因有限公 血样为试验材料 ，采用 RAPD标记对 其总 DNA进 司)。 行 了多态性研究 ，从分子水平上 阐明这 4个鸡 品系 1．3 基 因组 DNA 的提取及检 测 利用血液基 因 间的遗传差异及其遗传关系 ，并在此基础上进行 了 组 DNA