葡萄糖浓度的酶联荧光毛细分析法测定.pdfVIP

第29卷第8期 分析测试学报 V01．29No．8 2010年8月 FENXICESHIXUEBAO(JournalofInstrumentalAnalysis) 792～796 葡萄糖浓度的酶联荧光毛细分析法测定 杨海朋 ，王丙涛 ，吴春妮 ，施龙炎 ，戈早川 (1．深圳大学 材料学院 深圳市特种功能材料重点实验室，广东 深圳 518060： 2．深圳出入境检验检疫局 食品检验检疫技术中心，广东 深圳 518067) 摘 要：该文以葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶为催化剂，使含有对甲基酚的葡萄糖溶液体系通过酶偶联催 化反应生成荧光物质，从而实现对葡萄糖浓度的测定。优化的实验条件为：反应时间20min；NH 一NHcl 缓冲溶液 (pH10．4)；对甲基酚浓度 30．0p~mol／L。分别采用荧光毛细分析法和荧光光谱分析法测定了相同 浓度的系列葡萄糖溶液的荧光强度。在5．0～500．0I~mol／L范围内，两种方法测得的荧光强度均与葡萄糖浓 度的对数成正比。通过对比测试结果分析了两种方法的优缺点。 关键词：荧光毛细分析法；对甲基酚；葡萄糖氧化酶；辣根过氧化物酶 中图分类号：0433．1 文献标识码 ：A 文章编号：1004—4957(2010)08—0792—05 doi：10．3969／j．issn．1004—4957．2010．08．007 DeterminationofGlucosebyEnzymeFluorescenceCapillaryAnalysisMethod viaConjugatingGlucoseOxidasewithHorseradishPeroxidase YANGHai—peng ，WANGBing-tao ，WU Chun—ni，SHILong．yan ，GE Zao—chuan (1．ShenzhenKeyLaboratoryofSpecialFunctionalMaterials，CollegeofMaterialsScienceandEngineering，Shenzhen University，Shenzhen 518060，China；2．FoodI．~pectionandQuarantineCenter，ShenzhenEntry—Exit InspectionandQuarantineBureau，Shenzhen 518067，China) Abstract：Afluorescencecapillaryanalysis(FCA)methodwasdevelopedforthequickdetermination ofglucose．Glucosefirstlyreactedwithoxygentoproducehydrogenperoxidewiththecatalysisofglu— coseoxidase(GOx)．Thisreactionwascoupledwiththeoxidationreactionofp-creso1．whichwas catalyzedbyhorseradishperoxidase(HRP)inthepresenceofhydrogenperoxide，andproducedfluo． reseentsubstances，thedimmerofP—creso1．Base on thefluorescenceintensity ofthedimmerwas proportionaltothelogarithm ofglucoseconcentration，theconcentrationofglucosewasdetected．The optimalexperimentalconditionswereasthe follows：reaction time：20 min：buffersolution：pH 1O．4NH3一NH4C1；concentrationofP—cresol：30．0 fxmol／L．Undertheoptimum conditions，FCA