体外应用大鼠胰腺提取物诱导小鼠间充质干细胞分化为胰岛素产生细胞.pdfVIP

第 4O卷 第5期 解 剖 学 报 Vo1．40，No．5 2009年 10月 ACTA ANATOMICA SINICA 0ct．2oo9 ·789 · 体外应用大鼠胰腺提取物诱导小 鼠 间充质干细胞分化为胰 岛素产生细胞 李宏丹 穆长征 (辽宁医学 院 组织学胚胎学教研室 ，锦州 121001) [摘要] 目的 探讨大鼠胰腺提取物 (RPE)是否可以使小鼠骨髓间充质于细胞 (BMMSCs)分化为胰岛素产生 细胞(IPCs)，以及小鼠BMMSCs的分化条件，为糖尿病的干细胞治疗提供新的方法。 方法 传代纯化培养昆明小 鼠的骨髓间充质干细胞 ，应用 SD大 鼠的RPE诱导分化小 鼠BMMSCs为 IPCs，首先取 18瓶小 鼠BMMSCs随机分为 6 组，每组 3瓶 ，分别加入 RPE10mg／L、20mg／L、30mg／L、40mg／L、50mg／L、100mg／L，筛选 出最佳 的分化剂量 ，然后用最佳 的分化剂量(50mg／L)分化 BMMSCs，免疫酶细胞化学鉴定细胞内胰岛素的表达 ；双硫腙染色检测胰 岛素产生细胞 的 分化和纯度。放射免疫分析检测 C肽片段表达 。 结果 50mg／LRPE可 以使 间充质干细胞分化 良好 ，形态较规 则，1周后细胞分化成熟 ，双硫腙染色呈现猩红色 ；免疫酶细胞化学和免疫荧光细胞化学显示 ：胰 岛素表达 阳性 ，c 肽放射免疫学显示有 c肽释放 。 结论 RPE可以使小鼠的骨髓 间充质干细胞分化为胰 岛素产生细胞 。 [关键词] 胰腺提取物；骨髓间充质干细胞；胰岛素产生细胞；免疫酶细胞化学；放射免疫学；大鼠；小鼠 [中图分类号] R329．2 8 [文献标志码] A [DOI] 10．3969／j．issn．0529—1356．2009．05．019 Inducingmousemesenchymalstem cellstodifferentiateinto insulin-producingcellsbyratpancreaticextractin vitro LIHong—dan，MU Chang—zheng (Department0厂HistologyandEmbryology，LiaoningMedicalUnivenity，Jinzhou 121001，China) [Abstract] Objective Toresearchthemethodofmicebonemarrowmesenchymalstem cells(BMMSCs)trans— differentingintoinsulinproducingcells(IPCs)byratpancreaticextract(RPE)．Methods Mesenchymalstemcellswereisolated from Kunmingmouse，andRPE wasfrom SD rats’pancreases．PassagedBMMSCswereinduced tobe insulin—producingceHs (IPCs)withRPE．First，devidedmice’sBMMSCsto6groups，3cultureflaskspergroupatrandom，andaddedRPElOmg／L， 20mg／L，30mg／L，40mg／L，50mg／L，lOOmg／Ltoeachgroup．After1week，decidedwhichconcentrationofRPEwasbetter． AndinducemouseBMMSCstoIPCsbyit(50mg／L)．TheexpressionofinsulininIPCswasdetectedbyimmunoenzyme cyt