明胶基固定化过氧化氢酶修饰玻碳电极的生物传感器的研究.pdfVIP

第 32卷第 4期 明 胶 科 学 与 技 术 V01．32．No．4 2012年 12月 TheScienceandTechnologyofGelatin Dec．2012． } 研究报告 矗 ／ 气 ， 明胶基 固定化过氧化 氢酶修饰玻碳 电极 的 生物传感器 的研究 王昱琳 北京化工大学材料科学与工程学院，jE京 100029 摘要：通过物理吸附一化学交联对过氧化氢酶 中混入导电性好的碳材料可以实现直接 电子 固定化技术的设计与实现，成功地制备了新型 转移的第三代酶电极生物传感器。碳纳米管 明胶 一碳纳米管修饰的过氧化氢酶第三代传 (CNTs)具有独特的纳米尺度管状结构，大的 感器。对明胶基固定化过氧化氢酶的制备工 长径比，具有导电能力高、机械强度高、及化学 艺和酶反应体系进行优化，并揭示了影响规 稳定性好等优点 得到研究人员的关注，并 律，实现了无需电子媒介体传递对 H：O 的直 广泛应用于酶电极生物传感器中 -s]。同时 接电化学响应 。 CNTs也显示出与晶格螺旋性和弹性有关的异 常电子特性 [9】。CNTs修饰酶电极具有诸多优 关键词：明胶；过氧化氢酶；生物传感器 点n ：(1)能催化如过氧化氢酶、还原型辅酶 (NADH)等样品的氧化 一还原反应 ；(2)以其 明胶是一种典型的溶胶凝胶材料，具有较 为载体的固定化酶可以保持较高的生物活性； 强的粘性，易成膜，易与小分子醛类物质发生 (3)针对传感器的需求可对CNTs先进行化学 交联反应，且交联改性后具有较强的机械强 修饰，再进行酶的固定化；(4)可以实现直接 度，在酶电极生物传感器中应用广泛。Ka~o— 电化学响应。 henDeWael-1等用明胶作为生物敏感膜 的载 体材料修饰金电极，以细胞色素为电子媒介体 1 实验部分 制备过氧化氢生物传感器。明胶载体材料不 1．1 试剂 仅为生物分子提供了适宜的微环境实现其固 过氧化氢酶 (Cat)，(AladdinChemistry 定化，同时也促进了酶分子与电极间的电子传 Co．Ltd)； 输。SergeCosnierJ，AbbyW．Morgan3等均 明胶(Ge1)，B型； 以明胶为基础载体材料制备性能优异的酶电 多壁碳纳米管 (MWCNTs)，OD：20～30nm ； 极生物传感器，并且指出明胶膜致密度对生物 30％过氧化氢 (AR)； 分子的活性及与电极间的电子传输起到了非 50％戊二醛(GAD)、磷酸氢二钠、磷酸二 常关键的作用。 氢钠、柠檬酸、铁氰化钾、氯化钾等试剂均为分 以明胶为基础材料修饰的酶电极生物传 析纯，所用水均为二次蒸馏水 。 感器需要电子媒介体的辅助进行电子的传输。 1．2 方法 在此基础之上人们发现，在 电极基础载体材料 1．2．1 玻碳 电极 的预处理 $ e—mml：wy~0083@ 163．COrn 第32卷第4期 王昱琳 ：明胶基固定化过氧化氢酶修饰玻碳电极的生物传感器的研究 191· (1)用0．05Vzn的抛光粉将玻碳 电极在 化氢酶电极作为工作电极，饱和甘汞电极作为 抛光布上抛光 ，用二次蒸馏水清洗 电极。 参比电极 ，铂丝作为对电极。所有电化学检测 (2)抛光后的玻碳 电极用依次用乙醇和 均在浓度为0．5mM，pH7．0的磷酸缓冲底液， 二次蒸馏水超声清洗 5min．取出用二次蒸馏 25℃室温下进行。 水反复淋洗后晾干。 循环伏安测试 (CV)：