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! 第# 卷! 第$ 期 医 学 研 究生 学 报 %’( #! )( $
! *++, 年$ 月 -./01’ 2 345671’ 89:;/15.1:49 -.’( *++,
·论! ! 著 ·
人单纯疱疹病毒加强型绿色荧光蛋白
真核表达系统的构建及表达
李雷生，! 于! 红，! 张文卿
（青岛大学医学院微生物学教研室，山东青岛*,,+* ）
摘要：! 目的：构建人单纯疱疹病毒* 型（=%* ）加强型绿色荧光蛋白（?@A8 ）真核表达系统，用于=% 感染的快
速诊断。! 方法：通过8BC 扩增=%* 启动子DB8+ 目的基因片段，克隆至真核表达载体E?@A8，构建重组质粒
EDB8+?@A8 ，脂质体法转染%4/ 细胞，经@F G 筛选获得稳定转染细胞株%4/DB8+?@A8 。以不同量的=%*
感染%4/DB8+?@A8 细胞，分别于感染后, 、G 和+ H ，于倒置荧光显微镜下检测?@A8 荧光。同时以人巨细胞病
毒和柯萨奇病毒感染%4/DB8+?@A8 细胞，检测其特异性。! 结果：构建的重组质粒EDB8+?@A8 经I)J 测序
鉴定，表明重组正确。重组质粒 EDB8+?@A8 转染%4/ 细胞后，经 @F G 长期筛选建立稳定转染细胞株 %4/
DB8+?@A8 ，感染=%* 后, H ，倒置荧光显微镜下即可检测到?@A8 荧光。人巨细胞病毒和柯萨奇病毒感染%4/
DB8+?@A8 细胞后, 、+ 和*F H ，均未检测到特异性荧光。! 结论：成功构建了=%?@A8 真核表达系统，其具有
早期、快速、灵敏等优点，特异性较高，可望用于=% 感染的快速诊断。
关键词：
! 人单纯疱疹病毒* 型；! 绿色荧光蛋白；! 启动子DB8+
中图分类号：! CK$K( ! ! ! 文献标识码：! J! ! ! 文章编号：! ++GG##（*++, ）+$+LGK+K !
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