抗体産生機構に関する免疫病理学的研究：第5報卵白アIssue….pdfVIP

抗体産生機構に関する免疫病理学的研究：第5報 卵白ア Title ルブミン感作兎のリンパ節培養細胞による抗体産生 Author(s)奥山, 春枝; 浜田, 栄司; 森川, 和雄 Citation結核の研究 = TUBERCULOSIS RESEARCH, 27-28: 53-61 Issue Date1966_1967 Doc URL /2115/26786 Right Type bulletin Additional Information Instructions for use 53 抗体産生機構に関する免疫病理学的研究 第5報 卵白アルブミン感作兎のリンパ節培養細胞による抗体産生 奥山春枝 浜田栄司 森川和雄 〔北海道大学結核研究所病理部) 生体に抗尿車JI戟を与えた時;こおこる免疫反応、を in たものについて，細胞内抗体の証明を，培養上清内抗体 vitroの環境下で再現しようとする試みが，この約20年 証明，培養細胞の形態的変化と比較しつつ追及した。 間続けられてきてし、る。即ち，人間あるいは動物の，抗 実験材料及び実験方法 体産生組織とみなされている牌， リンパ節及び骨髄や， 末梢血内リンパ球を，組織片としたり，或いは細胞浮併 動物:体重2乃至4kgの家兎を用いた。 液として培養し，感作血球凝集反応，中和抗体測定，更 抗原:卵白から，硫安塩析法で、アルブミンを結品性に に鋭敏な方法として lsotope標識アミノ酸のとり込みを とり出し， 5回再結晶をくり返して精製したものを抗原 みる方法などで，抗体産生の証明がなされているO この とし7こO 様iこ，実験方法が多彩であることは，この実験が如何 なお，再感作兎の初感作には，カリミョウパン沈降卵 に困難であるかを物語っているといえる。抗原刺戟を 白アノレブミン液を， Porter法9) により作製して用いた。 znVZVOで行なった後にとり出した組織では， 培養中の 蛍光抗体液:卵白アルブミン 10mgf1凶生食水溶液 抗体産生が明らかに証明されているが，正常細胞を に，等量の Drackeol Arlacel9 : 1のadjuvant をま invitroで初めて抗原刺戟をした場合は，殊に細胞浮冷 ぜ、て乳液とし兎筋肉内に5日間隔で3回注射して，最 液培養においては殆んど陽性例をみていない。 終注射2週間後に採血し，沈降反応重層法による抗体価 invitroの抗体産生実験は，抗体産生細胞の同定と， 128倍稀釈以上陽性のものを，直ちに全採血して血清を その細胞の origin の決定ということが大きな目的とな 分離し硫安 1/3飽和で r-globulinを精製した。鐙光 っている。従って，培養細胞の形態的変化の追及と細胞 色素の標識は浜島ら 10)の方法により， 1 %r-globulin 内の抗体の証明が，培養液上清内の抗体証明と共に大切 溶液を 1/100量の Fluoresceinisothiocyanateで標識し， な手段となってくる。この細胞内抗体の直接的証明法と SephadexG50及び DEAE-cellulose columnを通して しては Coons1)により創始された蛍光抗体法の利用 蛍光抗体液を精製し，使用までー 0 25Cに保存した。