氟对人成骨细胞氧化应激和骨连接素表达的影响.pdfVIP

第 35卷 第 12期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Vol_35 No．12 2O12年 12月 JournalofXinjiangM edicalUniversity Dec．2O12 · 基础 医学研 究 · 氟对人成骨细胞氧化应激和骨连接素表达的影响 张亚楼 ，孙小娜 ，张 丽 ，邓 锋 ，王 媛 ，肖咏丽 (新疆 医科大学基础医学院组织胚胎学教研室 ，乌 鲁木 齐 830011； 。新疆维吾尔 自治 区疾病预防控制中心放射卫生与放射病防护科，乌鲁木齐 830002) 摘要 ：目的 观察氟对体外培养人成骨肉瘤细胞 内骨粘连蛋 白／骨连接素 (osteonectin，ON)基 因表达及氧化 应激状态的影响。方 法 采用 McCOY’S5A培养基培养人成骨 肉瘤细胞 Saos一2。按照染氟剂量将骨 肉瘤细胞 Saos一2分为0(对照组)、0．625、1．250、2．500、5．000、10．000、20．000、40．000、80．000mg／I组 。培养 24h后收集细 胞 ，实时荧光定量 PCR(real—timeRT—PCR)测定成骨细胞成骨相关基因 0NmRNA 的表达 ，用双标准 曲线法计算 基 因表达的相对 比值 。氧化应激状态用化学比色法分别测定超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)及丙二 醛 (malondialdehyde，MDA)的活性 。结果 0．625、1．250、2．500、5．000mg／I组成骨肉瘤细胞 ONmRNA表达分 别为 (0．0143±0．032)、(O．0573±0．02)、(O．0428±0．0177)、(0．0762±0．005)，低于对照组 ，差异有统计学意义 (P均O．01)，但 10．000、20．000mg／L组成骨 肉瘤细胞 ONmRNA表达分别为 (11．6土1．01)、(12．7±1．18)、 (1．65±0．oo)、(1．97士o．46)，明显高于对照组，差异有统计学意义 (PO．01)，组 问比较差异有统计学意义 (F一 305．842，P0．01)。5．000～80．000mg／I组 S0D 的活 性分 别 为 (94．14±3．16)、(63．36±3．63)、(53．00± 4．26)、(55．50±5．89)、(53．46±6．40)×10。U／g，与对照组[(122．34~6．99)×10。U／g]比较明显降低，组间比较差 异有统计学意义 (F一 21．734，PO．01)。10．00mg／L组 MDA的活性为(7．74±1．43)~mol／g，与对照组[(4．99 4- _ 0．65)Mmol／g]比较 明显升高，组间比较差异有统计学意义 (F一3．067，PO．05)。成骨细胞内ON表达水平与 SOD活力呈明显负相关 。结论 氟可能通过影响成骨细胞 内骨连接素基因的表达和氧化应激状态而改变正常 的 成骨分化 。 关键词 ：氟 中毒 ；基因表达 ；骨连接素 ；骨代谢 中图分类号：R12 文献标识码 ：A 文章编号 ：1009—555l(2012)12—1627—06 Theimpactoffluorideonoxidativestressandosteonectinexpression ofhumanosteoblast ZHANG Ya-lou ，SUN Xiao-na ，ZHANG Li，DENG Feng ，W ANG Yuan ，XIAO Yong-li (DepartmentofHistologyandEmbryology，BasicMedicineCollege，XinjiangMedicalUniversity， Urumqi830011，China；DepartmentofRadiationDiseaseProtectionandRadiationHygiene， XnjiangUygurAutonomousRegionCenterforDiseaseCo